发明名称 |
一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法 |
摘要 |
本发明涉及一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法,其特征在于:根据Tri5基因信息设计一对特异性引物,该引物具有高度特异性,上游引物tri5S1: 5’-CCT CAC CCT CAG ATG TTG ACA TAC-3’和下游引物:5’-tri5S2: TCC TTG TAG AAG GAC ATG AGG TCG-3’;利用该引物对黑葡萄穗霉菌的总DNA进行PCR扩增。利用琼脂糖凝胶电泳检测产物,分离得到单端孢霉烯族A类毒素菌株的特异性片段,其长度为460bp的条带,而不产单端孢霉烯族A类毒素的黑葡萄穗霉菌中不能扩增到该特异片段;根据产物片段的有无及大小,确定某一黑葡萄穗霉菌是否产单端孢霉烯族A类毒素。 |
申请公布号 |
CN105154562A |
申请公布日期 |
2015.12.16 |
申请号 |
CN201510636965.4 |
申请日期 |
2015.10.03 |
申请人 |
临沂大学 |
发明人 |
钟文文;许俊杰;张海娟;李紫嫣;倪荣;李娇娇 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法,其特征在于:1)根据Tri5基因信息设计一对高度特异性引物,上游引物tri5S1: 5’‑ CCT CAC CCT CAG ATG TTG ACA TAC‑3’和下游引物tri5S2: 5’‑ TCCTTGTAGAAGGACATGAGGTCG‑3’;2)利用该引物对黑葡萄穗霉菌的总DNA进行PCR扩增,扩增反应条件为:94℃,10min~94℃,1min,~53℃,30snd,~72℃,1min~4℃,10min,38个循环;3)利用琼脂糖凝胶电泳检测产物,分离得到长度为460bp的条带的单端孢霉烯族A类毒素菌株的特异性片段;4) 根据产物片段的有无,或者能得到的条带片段的长度是否为460bp,判断某一黑葡萄穗霉菌是否产单端孢霉烯族A类毒素。 |
地址 |
276000 山东省临沂市兰山区双岭路中段临沂大学 |