一种检测发热伴血小板减少综合征病毒的恒温扩增试剂盒及应用

摘要

本发明涉及一种试剂盒及其应用，尤其是一种检测发热伴血小板减少综合征病毒的恒温扩增试剂盒及应用，属于生物技术领域。本发明进一步提供含有寡核苷酸的检测发热伴血小板减少综合征病毒的恒温扩增试剂盒，包括以下组分：(1)RNA提取试剂；(2)恒温扩增反应液，包括1×Bst Buffer、甜菜碱、MgSO₄、dNTPs、RNase抑制剂、Bst DNA聚合酶、AMV逆转录酶、灭菌去离子水、所述上下游链置换引物、上下游探针和一条交叉扩增引物；(3)阳性对照模板，为发热伴血小板减少综合征病毒M基因片段的体外转录产物；(4)阴性对照，灭菌去离子水。本发明具有检测灵敏度高、特异性强、操作步骤简单、可重复性高、反应时间短等特性，且整个反应过程均在同一温度下进行，仅需一个恒温仪器即可完成检测，具有广阔的应用前景。

主权项

检测发热伴血小板减少综合征病毒的寡核苷酸，包括上下游链置换引物、上下游探针和交叉扩增引物；所述上下游链置换引物分别为SFTS‑M‑F3：5′‑TGGATGTTGGCCACTCTC‑3′；SFTS‑M‑B3：5′‑TTCTTCTGATTCAGAACA‑3′；所述上下游探针分别为上游5′端FITC标记探针SFTS‑M‑DF5F：5′‑FITC‑GAGAGCTCATCCAAGGAT‑3′；下游5′端Biotin标记探针SFTS‑M‑DF5B：5′‑Biotin‑AGCACAAGACCAAATGGGT‑3′；所述交叉扩增引物为SFTS‑M‑CPR：5′‑AGCACAAGACCAAATGGGTTCCCTTCCTTATAGCACAC‑3′。