发明名称 |
用于增强基因表达的新型基因间元件 |
摘要 |
本发明涉及含有基因组核苷酸序列的核酸片段和构建体,所述基因组核苷酸序列位于与基因间转录有关的Rb1和p15C的上游,用于在真核宿主细胞,优选哺乳动物宿主细胞中在严格可筛选标记存在的条件下生产目的基因产物。本发明进一步涉及含有所述核酸构建体的宿主细胞,生产所述宿主细胞的方法和使用所述宿主细胞生产目的基因产物的方法。 |
申请公布号 |
CN103038352B |
申请公布日期 |
2015.12.16 |
申请号 |
CN201180029783.0 |
申请日期 |
2011.06.15 |
申请人 |
萨拉基尼克有限公司 |
发明人 |
A·P·奥特;M·西普;J·A·沃赫斯;F·霍克萨马;H·J·M·范布洛克兰德 |
分类号 |
C12N15/65(2006.01)I;C12N15/67(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/65(2006.01)I |
代理机构 |
北京润平知识产权代理有限公司 11283 |
代理人 |
王凤桐;周建秋 |
主权项 |
一种核酸构建体,该核酸构建体包括连接到表达盒上的核酸片段,所述表达盒含有与编码目的基因产物的核苷酸序列可操作地连接的启动子,其中,所述核酸片段包括:位于脊椎动物Rb1基因的翻译起始位点上游的基因组区域的1000至15000个连续核苷酸;其中,所述片段当与具有SEQ ID NO:9的核苷酸序列的表达盒直接在表达盒的上游位置和下游位置侧面连接时,与在表达盒的上游侧面连接STAR 7和STAR 67且在表达盒的下游侧面连接STAR 7的相同表达盒相比,至少产生50%的克隆数;其中,所述克隆数在如下的条件下进行测试:用脂质体2000将构建体相同数量的DNA转染至CHO‑DG44细胞中,在含有400μg/ml博莱霉素的培养基中进行筛选,转染24小时后添加博莱霉素;其中,所述核酸片段为包括以下核苷酸残基的片段:a)SEQ ID NO:5的1‑1482、1‑2018或1‑3498的核苷酸残基;b)SEQ ID NO:6的1‑3424或2425‑3424的核苷酸残基;和c)SEQ ID NO:7的1‑3064、1‑2500或1‑2000的核苷酸残基。 |
地址 |
荷兰阿姆斯特丹 |