一种利用酶法制备特定分子量水溶性壳聚糖的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体公开了一种利用酶法制备特定分子量水溶性壳聚糖的方法，该方法以脱乙酰度高于80%的壳聚糖为原料，溶胀后经专一性酶水解、控制反应终点、水解液浓缩、冷冻干燥等过程制备出特定分子量的水溶性壳聚糖。该方法通过控制酶添加量、反应时间和溶液粘度，可获得含量高、水溶性好、特定分子量的壳聚糖，且具有工艺简单、反应速度快、专一性强、成本低、安全环保等优点。

主权项

一种利用酶法制备特定分子量水溶性壳聚糖的方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)粘均分子量曲线的获得先配制w/v 2％的壳聚糖溶液，之后利用已知酶和技术将其水解制备成一系列特定分子量的壳聚糖，测定反应液粘度和粘均分子量，以反应液粘度和粘均分子量绘制曲线；(2)溶胀：取壳聚糖原料于反应容器中，用水配制成w/v 2％～8％的壳聚糖溶液，加酸调节溶液的pH为4～6，不断搅拌，于40℃～60℃水浴中溶胀60～120分钟；(3)水解：按照壳聚糖质量以0.1U/g～6U/g的比例在反应容器中加入酶，开始反应，至理论酶解完全时间之前10～15分钟，开始每间隔5分钟取样一次，取样稀释至反应液浓度为w/v 2％，测定其溶液粘度，至预定粘度后水解过程结束，之后利用沸水浴灭酶10‑30分钟，结束反应，即得特定分子量的壳聚糖溶液；上述水解过程控制在60～150分钟；(4)干燥：将上述壳聚糖溶液冷却，经4000r/min～12000r/min离心机离心或滤布过滤，获得的壳聚糖澄清溶液直接喷雾干燥，或经旋转蒸发器浓缩至1/2～1/4体积后冷冻干燥，即得固体水溶性壳聚糖。