嵌合内切核酸酶及其用途

摘要

本发明涉及包含内切核酸酶和异源DNA结合结构域的嵌合内切核酸酶，所述异源DNA结合结构域包含一个或多个Zn₂C₆锌指，本发明还涉及使用此类嵌合内切核酸酶对多核苷酸进行靶向整合、靶向缺失或靶向突变的方法。

主权项

由LAGLIDADG内切核酸酶和异源DNA结合结构域组成的嵌合内切核酸酶，其中所述LAGLIDADG内切核酸酶由与SEQ ID NO:1、2或3所描述的多肽具有至少95％的氨基酸序列同一性的氨基酸序列组成并具有I‑SceI酶活性，并且所述异源DNA结合结构域由Zn₂C₆锌指组成，所述Zn₂C₆锌指与SEQ ID NO:70所描述的多肽具有至少95％氨基酸序列同一性，其中所述LAGLIDADG内切核酸酶不具有如下突变：I38S、I38N、G39D、G39R、L40Q、L42R、D44E、D44G、D44H、D44S、A45E、A45D、Y46D、I47R、I47N、D144E、D145E、D145N和G146E，并且其中所述异源DNA结合结构域具有图10所示的共有序列。