一种定性、定量一体化检测乳品掺次的方法

摘要

本发明涉及的是生物分析技术和食品检验领域，提供了一种定性、定量一体化检测乳品掺次的方法，是一种整合了十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、液相色谱质谱联用和移动反应界面电泳滴定的完整技术方案，具体为一种由定性鉴定是否掺次、到甄别掺次蛋白种类、再到定量分析掺次蛋白比率的完整技术路线。与现有的检测方法相比，本发明具有如下有益效果：该方法能够有效鉴定乳品食品是否掺次，定性甄别掺次蛋白质的种类，并且定量的测定掺次程度；不仅限于乳制品的检测，该方法还可用于其他蛋白食品的从定性甄别到定量分析的检测；相比传统的蛋白质检测方法，该方法能够避免非蛋白氮的干扰。

主权项

一种定性、定量一体化检测乳品掺次的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：A、对纯乳品和待测样品进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳，比对所述待测样品与所述纯乳品电泳指纹图谱是否相同、密度是否一致；选出电泳指纹图谱中待测样品区别于所述纯乳品的差异条带，并将所述差异条带切割、酶解；B、对所述酶解后的样品进行液相色谱质谱联用分析实验，将所述分析结果中相对丰度高的蛋白质与现有数据库中蛋白进行比对，确定所述待测样品中掺次蛋白的种类；C、分别以所述纯乳品和所述掺次蛋白的纯品为标准品，进行移动反应界面电泳滴定，利用移动反应界面阻滞信号R_MRB与蛋白浓度存在的线性关系建立两条标准曲线，获得所述纯乳品的标准曲线斜率α₁、所述掺次蛋白纯品的标准曲线斜率α₂以及截距b；D、采用与步骤C条件相同的移动反应界面电泳滴定法，对所述待测样品进行移动反应界面电泳滴定，获得阻滞信号R_mix，并检测其蛋白浓度C_mix；E、将所述阻滞信号R_mix、蛋白含量C_mix带入方程式获得待测样品中所述掺次蛋白质和乳品蛋白的浓度比值；其中，C_pro，1为待测样品中乳品的蛋白质浓度，C_pro，2为待测样品中掺次蛋白的浓度。