一种扇贝内脏低聚糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种扇贝内脏低聚糖的制备方法，属于低聚糖制备领域。本发明先用扇贝内脏中制成内脏酶解液，再从酶解液中提取出扇贝内脏粗多糖，对多糖进行脱蛋白质后，向其中加入甲酰胺和氯磺酸制成的混酸，进行搅拌反应，反应后加入乙醇进行，最后将醇沉进行分离得上清液，再进行透析、浓缩、干燥、粉碎即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖，本发明将扇贝内脏采用酶法提取多糖，再用甲酰胺-氯磺酸法转化成低聚糖，该反应条件温和，低聚糖得率高，而且还可以提高废弃扇贝内脏的综合利用率，变废为宝，对环境友好。

主权项

一种扇贝内脏低聚糖的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）收集新鲜的扇贝，开壳后取扇贝内脏，之后放入组织捣碎机，加入扇贝内脏总质量5～10倍的蒸馏水，进行捣碎、打浆处理，制得扇贝内脏组织浆液；（2）将上述扇贝内脏组织浆液放入浓缩罐，减压至1100～1200Pa，浓缩处理10～15min，之后过滤去除杂质得到扇贝内脏过滤液，再将扇贝内脏过滤液移入酶解罐中，用质量浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH至7～8，加入扇贝内脏过滤液总质量0.2～0.3%的木瓜蛋白酶，温度控制在40～50℃，放在磁力搅拌机上以300～400r/min的转速搅拌15～20min后，密封酶解3～4h，得扇贝内脏酶解液；（3）将上述制得的扇贝内脏酶解液水浴加热至90～95℃，保温10～20min，对其进行灭酶处理，待灭酶后的扇贝内脏酶解液冷却至室温后，移入卧式离心机，设置转速为4000～5000r/min，离心处理10～15min，分离去除沉淀得到上清液；（4）将得到的上清液倒入锥形瓶，加入上清液3倍体积的质量浓度为95%的乙醇溶液，用薄膜密封瓶口，置于冷冻装置中在4～6℃下醇沉12～18h，醇沉液用高速离心机在5000～6000r/min的转速下离心处理10～15min后，分离去除上清液得到沉淀物，将沉淀物放入烘箱在105～110℃下烘干，得到扇贝内脏粗多糖；（5）称取100～200g上述制得的扇贝内脏粗多糖倒入500mL烧杯中，加入200～300mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀，之后逐滴加入质量浓度为3～5%的三氯乙酸，直至多糖溶液中沉淀不再产生为止，过滤去除沉淀，得脱蛋白后的扇贝内脏多糖溶液；（6）量取6～10mL质量浓度为80%的甲酰胺加入附有冷凝管和搅拌器的250mL三颈瓶中，之后移入冰水浴，在4～5℃下用恒压滴液漏斗逐滴加入9～10mL质量浓度为90%的氯磺酸，启动搅拌器，以300～400r/min的转速搅拌均匀，制得混酸；（7）将上述制得的混酸按体积比为1:1的比例加入到扇贝内脏多糖溶液中，常温下用磁力搅拌机搅拌反应5～6h，搅拌转速为500～600r/min，之后向反应液中加入其体积2～3倍的质量浓度为90%的乙醇溶液，进行醇沉12～18h；（8）将上述醇沉用高速离心机在7000～8000r/min的转速下离心处理10～15min后，分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋，用流动蒸馏水透析3～5天后，将透析物移入浓缩罐，减压至800～900Pa进行浓缩处理，浓缩液用真空冷冻干燥机干燥后，经气流粉碎机粉碎并过50～60目标准筛，即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖。