从杜仲叶中提取京尼平的方法

摘要

本发明公开了从杜仲叶中提取京尼平的方法，包括下述步骤:预湿堆放、原料处理、第一次酶解、去油、第二次酶解、柱层析、第三次酶解、柱层析、干燥。本发明先采用酶提取植物油脂，利用非油成分对油和水的亲和力差异及油水比重不同而将油和非油成分分离，增加了产品收率和提高了转化率。

主权项

从杜仲叶中提取京尼平的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)预湿堆放：将杜仲叶在阴凉处建堆，喷水，待水从堆底部流出后，自然堆放；2)原料处理：将步骤1)得到的杜仲叶粉碎或破碎，加入相当于原料2‑3倍重量的纯净水，加热至50‑60℃维持5‑10分钟，得到膏状浆液；3)第一次酶解：将步骤2)得到的膏状浆液，调pH为4‑5，加入膏状浆液0.05‑0.1％重量份的果胶‑纤维素复合酶和0.001重量份的甘露醇进行酶解40‑60分钟，得到第一次酶解液；4)去油：将步骤3)得到的第一次酶解液，加入2‑3倍重量的纯净水，加热至60‑70℃浸提60‑120分钟，得上层浮油液与下层液、渣混合物，分离；5)第二次酶解：将步骤4)得到的下层液、渣混合物，调pH为4.5，加入相当于混合物0.1‑0.2％重量份的纤维素酶进行酶解40‑60分钟，得到第二次酶解液，重复两次；6)柱层析：合并第二次酶解液，过滤，浓缩，通过柱层析，用大孔吸附树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为15‑20％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；7)第三次酶解：将步骤6)得到的洗脱液，调pH为4.5，加入β‑葡萄糖苷酶进行酶解，酶的用量为洗脱液重量的5‑10％，酶的浓度为1mg/ml，酶解温度为50‑60℃；8)柱层析：将步骤7)得到酶解液，通过柱层析，用大孔树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为10‑20％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；9)干燥：将步骤8)得到的洗脱液浓缩，再通过干燥得到粉末状京尼平。