包含RAMP功能的通用蛋白质过表达标记及其应用

摘要

本发明涉及一种RAMP标记(ramp tag)，其能够解决使重组蛋白质在大肠菌(E.coli)中表达时因外源基因中的密码子(codon)与宿主的相容性差而发生的翻译速度的不稳定性。与解决稀有密码子(rare codon)的问题的以往的密码子优化(codon optimization)或密码子去优化(codon deoptimization)方法不同，本发明不更换原来的密码子序列，而仅通过使RAMP标记与目标基因融合或独立地表达，再使用tRNA，从而增加目标蛋白质的表达效率。由此，本发明作为与人工合成DNA序列的密码子优化方法相比能够减少费用和时间并增加重组蛋白质表达的新方法，被期待可利用于附加价值高的医药品或工业用酶的生产。

主权项

一种翻译速度调节用RAMP标记的制造方法，其包括：制作与宿主细胞相应的稀有密码子表的步骤；将目标基因的DNA序列转换为密码子的步骤；分析所述制作的稀有密码子表中的稀有密码子在目标基因ORF即开放读码框中出现的频率和位置的步骤；以及收集稀有密码子并进行配置的步骤。