主权项 |
一种蓝藻去除方法,其特征在于具体步骤为:(1)取含有蓝藻的水样50~100mL,向其中加入乙醇,加入的乙醇与水样体积比为3:5~4:5,在频率为300~450赫兹的超声波下震动15~25min;(2)将上述经超声波处理过后的水样调节pH为3.0~4.0,用无纺纱布过滤;(3)将无纺纱布过滤后的滤液进行离心分离,取上清液;(4)将上述上清液过碳酸钙色谱柱,用体积含量为40%的甲醇水溶液淋洗,再用体积含量为95%的甲醇水溶液洗脱,得含有蓝藻毒素的洗脱液;(5)将上述的含有蓝藻毒素的洗脱液浓缩、蒸馏,得蓝藻毒素提取液;(6)取鲜活3~5条鲜活鳙鱼的内脏,清洗干净后重复上述(1)~(5)步骤得鳙鱼内脏及组织提取液;(7)将蓝藻毒素提取液与鳙鱼内脏及组织提取液混合,在潮湿阴凉条件下使其发霉,待霉芽长到3~5cm为宜;(8)将发霉的混合液接种到固体培养基上,于25℃温度下培养7~10天,得霉菌孢子培养物,所述固体培养基为琼脂固体斜面;(9)用无菌水将霉菌孢子培养物制成悬浮液接种到罐内已灭菌的培养基中,并通入无菌空气、搅拌,于27℃温度下培养20~28h,得种子培养液;(10)然后将得到的种子培养液接种到含有苯乙酸前体的培养基中,通入无菌空气,搅拌,并保持温度培养5~8天,得霉素发酵液;(11)将上述霉素发酵液冷却,过滤,滤液在pH为2~2.5的条件下,用醋酸丁酯进行多级逆流萃取,再用pH7.0~7.2的缓冲液调节,活性炭脱色,经共沸蒸馏即可得霉菌提取液;(12)把上述得到的霉菌提取液加热煮沸,变为气体通入充满氮气的密闭箱中,使其在气相中浓度为50~80ppm,再把刚打捞上来的蓝藻放入密闭箱中,自然吸收3~5天,待其颜色变淡发黑,从密闭箱中取出;(13)以每30~50m<sup>2</sup>的区域面积投入30~50g上述从密闭箱中经霉菌处理后变淡发黑的蓝藻计算,分区覆盖整个区域水体。 |