联合鉴定小麦对Bipolaris sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法

摘要

本发明公开了一种联合鉴定小麦对B.sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法。首先将4℃保存的B.sorokiniana单孢菌株切成块状，接种于PDA培养基上暗培养，培养后将孢子刮下，冲洗、纱布过滤，得到孢子悬浮液，调整孢子浓度；小麦抽穗后，将穗部及旗叶套袋；开花后第6天，将所得B.sorokiniana孢子悬浮液摇匀，喷洒在穗部及旗叶，套袋、保湿；接菌后记录病斑面积百分率和黑胚率，根据记录结果来同时评价小麦对B.sorokiniana黑胚病与叶枯病的抗性。本发明鉴定方法与大田自然发病率鉴定相比，提高了鉴定结果的准确性与可靠性，与两种病害分开鉴定相比，大大提高了鉴定的效率。

主权项

一种联合鉴定小麦对小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法，其特征在于，所述联合鉴定方法包括以下步骤：a、小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana的保存：将实验室分离的小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana单孢菌株置于马铃薯葡萄糖琼脂PDA试管斜面培养基上，于4℃冰箱保存备用；b、小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana的孢子悬浮液的制备：将步骤a中4℃冰箱保存的小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana切成0.3cm²的块状，接种于马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基上，在25℃条件下暗培养，培养后用载玻片从培养好的菌落上将孢子刮下，采用蒸馏水冲洗、纱布过滤，得到孢子悬浮液，用血球计数板检测孢子悬浮液的浓度，调整至孢子浓度为3×10⁵个/mL，配置得到的孢子悬浮液放在溶液瓶中于4℃冰箱保存备用；c、喷洒接菌、套袋保湿：小麦抽穗后，采用硫酸纸袋将小麦穗部及旗叶套袋；在小麦开花后第6天，将步骤b制备的Bipolaris sorokiniana孢子悬浮液摇匀，然后均匀喷洒在小麦穗部及旗叶，喷洒后采用塑料袋将小麦穗部及旗叶罩住保湿，保湿7天后换套硫酸纸袋；d、鉴定结果记录：接菌后第15～18天记录叶片病斑面积占总叶片面积的百分比即为病斑面积百分率，作为小麦叶枯病抗性的评价指标；小麦收获后晾晒干，手工脱粒，统计黑胚籽粒占籽粒总数的百分比即为黑胚率，作为小麦黑胚病抗性的评价指标；e、抗病性评价：根据步骤d记录所得病斑面积百分率和黑胚率来同时评价小麦对小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana黑胚病与叶枯病的抗性。