一种鱼胶原基双重缓释药膜的制备方法

摘要

本发明涉及一种鱼胶原基双重缓释药膜及其制备方法。它是以生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖自聚集纳米粒包载抗肿瘤药物，再将该载药纳米粒与废弃鱼皮胶原、壳聚糖复合，经冷冻干燥制成鱼胶原基双重缓释药膜。该药膜具有局部缓释、减少全身毒副作用等优点。

主权项

一种鱼胶原基双重缓释药膜的制备方法，其特征在于：采用生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖自聚集纳米粒包载抗肿瘤药物，再将其与废弃鱼皮胶原、壳聚糖复合制备，即得鱼胶原基双重缓释药膜；具体步骤包括：1）将胆甾醇琥珀酸酯溶于体积分数为65‑90%的乙醇溶液，在N‑羟基琥珀酰亚胺与碳二亚胺类活化剂作用下反应4‑15 h后，加入乙二醇壳聚糖水溶液，20‑60℃反应24‑96 h，即得胆甾醇化乙二醇壳聚糖；将胆甾醇化乙二醇壳聚糖、生物素、N‑羟基琥珀酰亚胺与碳二亚胺类活化剂溶解于二甲基亚砜中，20‑60℃反应12‑48 h，即得生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖，其中，乙二醇壳聚糖/胆甾醇琥珀酸酯摩尔比为1:1‑20；胆甾醇化乙二醇壳聚糖/生物素摩尔比为1:1‑20；2）将生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖溶于2‑25%的乙酸溶液，探头超声、透析12‑48h，即得生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖自聚集纳米粒；将阿霉素二甲基亚砜溶液缓慢滴至生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖纳米粒溶液中，透析6‑48h，即得生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖载药纳米粒；所述载药纳米粒中生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖与阿霉素的质量比为20‑1:1；3）废弃鱼皮去鳞，切碎洗净，于10‑30倍原料重的含体积分数为0.1‑1% H₂O₂的NaOH溶液中搅拌浸泡24‑48 h，用蒸馏水洗至中性；在异丙醇溶液中搅拌浸泡4 h，蒸馏水洗至中性；在质量分数为2.5%NaCl溶液中搅拌浸泡10 h，过滤，得预处理的碎鱼皮；将碎鱼皮与蒸馏水以料液比为1:5‑10混合，加入胃蛋白酶酶解10‑30 h，pH 2.0‑4.0，过滤、离心，取上清液加入2%乙酸溶液，过滤，蒸馏水中透析24 h，冷冻干燥得鱼皮胶原蛋白；所述NaOH溶液的浓度为0.01‑0.1 mol/L，异丙醇溶液的体积分数为5‑20%；胃蛋白酶占鱼皮的质量分数为1‑3%，酶解的温度为0‑10℃；4）将鱼皮胶原蛋白与壳聚糖溶于2%乙酸溶液，蒸馏水透析24 h后加入生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖载药纳米粒水溶液，搅拌，冻干后添加交联剂交联，产物经蒸馏水洗至中性，二次冷冻干燥即得鱼胶原基双重缓释药膜；所述药膜胶原蛋白与壳聚糖的质量比为10‑1:1；胶原/生物素偶联胆甾醇化乙二醇壳聚糖的质量比为20‑3:1。