一种一步法裂解CPC生产7-ACA的酰化酶及编码它的多核苷酸

摘要

本发明公开了一种一步法裂解CPC生产7-ACA的酰化酶及编码它的多核苷酸，含有该核苷酸序列的重组表达载体和重组表达转化体及其制备方法，以及该重组酶在合成7-ACA中的应用。所述CPC酰化酶是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第180位的缬氨酸经过取代且具有CPC酰化酶活性的蛋白质；(b)在(a)中的氨基酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸且具有CPC酰化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明公开的CPC酰化酶的酶活性和底物耐受性均有提高，从而为CPC酰化酶的人工定向进化改造提供了有力前提。

主权项

一种CPC酰化酶，其特征在于，所述CPC酰化酶是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第180位的缬氨酸经过取代且具有CPC酰化酶活性的蛋白质，所述的蛋白质的第180位的缬氨酸取代为丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、色氨酸、甘氨酸、苏氨酸或丝氨酸；(b)在(a)中的氨基酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸且具有CPC酰化酶活性的由(a)衍生的蛋白质，所述的一个或几个氨基酸组成的肽段是信号肽或蛋白标签。