PH450酶的大量制备方法

摘要

本发明提供了一种PH450酶的大量制备方法，包括：获取蓝藻并进行大量培养，并在培养过程中用PH450酶诱导剂进行诱导；在大量培养结束后收集蓝藻细胞，提取蓝藻细胞总蛋白；用人PH450酶作为抗原进行免疫反应，制备多克隆抗体；以多克隆抗体作为亲和介质制备亲和层析柱；将提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱。本发明上述PH450酶的大量制备方法，基于蓝藻和人PH450酶在蛋白质的三维结构、活性功能几乎完全相同，且蓝藻代谢简单、易于诱导和分离的情形，将蓝藻诱导培养产物用PH450酶的特异性抗体进行亲和层析；相比现有的基因工程菌发酵制备的方法，本发明大量制备的PH450酶是蓝藻细胞代谢中产生的活性酶，品质比较好具有活性；而且纯化分离过程简单，方法的效益更高。

主权项

一种PH450酶的大量制备方法，其特征在于，包括如下步骤：获取蓝藻并进行大量培养，并在培养过程中用PH450酶诱导剂进行诱导；在所述大量培养结束后收集蓝藻细胞，提取蓝藻细胞总蛋白；用人PH450酶作为抗原进行免疫反应，制备多克隆抗体；以所述多克隆抗体作为亲和介质制备亲和层析柱；将所述提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱。