一种分离纯化11α-羟基坎利酮的方法

摘要

本发明涉及一种使用大孔树脂分离纯化11α-羟基坎利酮的方法，包括菌丝体分离、烘干粉碎、加热醇提取、大孔树脂柱吸附分离纯化、加压连续层析、浓缩烘干。工艺流程简单，成本低，效益高，层析柱可以活化再生，适合工业化分离纯化11α-羟基坎利酮。使用甲醇溶液加热提取，可使11α-羟基坎利酮提取率较高。采用AB-8大孔树脂，可在高压恒流泵驱动下连续层析，最终获得较纯的11α-羟基坎利酮。

主权项

一种分离纯化11α‑羟基坎利酮的方法，其特征在于，按照以下步骤进行：（1）将根霉(Rhizopus sp．UJS‑0602)或赭曲霉(Aspergillus ochraceus)转化坎利酮制得的含有11α‑羟基坎利酮的发酵液进行1000‑6000 r/min离心10‑30分钟或抽滤后，取菌丝体40‑100℃烘干，粉碎至50‑200目；（2）提取：将粉碎过的菌丝体用1‑8倍体积的浓度为20‑90%去离子水稀释的甲醇水溶液，于35‑60℃浸泡0.5‑5小时后，1000‑3000r/min离心10‑30分钟或过滤后，用0.5‑5倍体积的浓度为20‑90%甲醇水溶液洗涤滤渣，过滤，合并滤液；（3）分离：滤液上AB‑8大孔树脂柱，单柱上样，双柱洗脱；第一根上至饱和，第二根上至10‑80%饱和；然后将两根树脂柱按照第一根在上，第二根在下的方式串联，开始洗脱；先用20‑60%的甲醇水溶液洗脱2‑10BV；然后再用60‑90%的甲醇水溶液洗脱2‑10BV；（4）将含11α‑羟基坎利酮的洗脱流分合并，在40‑60℃下减压浓缩后，在40‑90℃下烘干，得到提纯的11α‑羟基坎利酮；（5）将柱子用1‑5倍乙酸乙酯洗脱AB‑8大孔树脂柱再生，然后用蒸馏水洗至无乙酸乙酯味即可重复使用。