高负载及pH可控释放阿霉素的纳米钻石药物制备和应用

摘要

本发明提供了一种高负载及pH可控释放阿霉素的纳米钻石药物制备和应用。本发明首先用H₂N-PEG-COOH修饰纳米钻石，合成ND-PEG-COOH载体，其次在柠檬酸钠或醋酸钠条件下物理吸附阿霉素制得目标药物纳米钻石-聚乙二醇-阿霉素/柠檬酸钠(ND-PEG-DOX/Na₃Cit)或纳米钻石-聚乙二醇-阿霉素/醋酸钠(ND-PEG-DOX/NaAc)。经过体外释药实验、MTT实验和流式细胞仪检测细胞摄取纳米药物实验，表明ND-PEG-DOX/Na₃Cit和ND-PEG-DOX/NaAc可诱导肿瘤细胞凋亡，其可在制备抗肿瘤药物中应用。

主权项

一种高负载及pH可控释放阿霉素的纳米钻石药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)称取真空干燥的羧基化纳米钻石，按每毫克羧基化纳米钻石加入1‑1.5mL的浓度为0.1M、pH为5.8的MES缓冲溶液中，超声分散30min形成悬浊液，再按每毫克羧基化纳米钻石加入0.2mg EDC、0.25mg NHS，室温搅拌反应6h，反应完毕后以15000rpm高速离心5min弃除上清液，得到活化羧基的纳米钻石沉淀物；接着将活化羧基的纳米钻石沉淀物迅速分散到浓度为0.1M、pH为8.4的硼酸缓冲溶液中，经过短暂超声分散形成悬浊液，再按每毫克活化羧基的纳米钻石快速加入0.3mg H₂N‑PEG‑COOH，继续室温搅拌反应12h，待反应结束，以15000rpm高速离心5min吸除上清液，并用0.1M、pH 8.4的硼酸缓冲溶液高速离心洗涤三次，获得ND‑PEG‑COOH沉淀物；(2)称取真空干燥的ND‑PEG‑COOH，按每毫克ND‑PEG‑COOH加入1mL浓度为1.0M的柠檬酸钠溶液中，超声分散1h形成悬浊液，再按ND‑PEG‑COOH与阿霉素质量比为5：1加入阿霉素，摇匀，避光反应6h，以15000rpm离心5min，用1.0M的柠檬酸钠溶液洗涤3次，制得pH可控释放阿霉素的纳米钻石药物ND‑PEG‑DOX/Na₃Cit真空干燥，冷藏，避光保存。