发明名称 一种诱导骨髓间充质干细胞分化及增值的方法及装置
摘要 本发明公开了一种诱导骨髓间充质干细胞分化及增值的方法及装置,属于生物细胞工程神经再修复技术领域。包括以下步骤:1)取两根导电铜丝,固定于导电玻璃导电面的两端,固定后进行灭菌处理,备用;2)取新鲜离体肱骨,清洗后将骨髓间充质干细胞吸至离心管,离心去除上清液,加入培养基吹打均匀,再接种至培养瓶中,培养3~5代后备用;3)将步骤2)培养的细胞接种至步骤1)处理后的导电玻璃上,培养后,对细胞进行电刺激,通过免疫荧光染色和基因表达检测,得出细胞向神经元方向分化结果。采用对机体和细胞均无害的低频交流电,采用物理刺激的方法刺激干细胞,使其能够向神经方向分化;且此方法易操作,能随时给予电刺激,具有很高的可控性。
申请公布号 CN105087544A 申请公布日期 2015.11.25
申请号 CN201510578804.4 申请日期 2015.09.11
申请人 中国人民解放军第四军医大学 发明人 黄景辉;杨亚锋;罗卓荆;黄亮亮;马腾;朱雷
分类号 C12N13/00(2006.01)I;C12N5/0775(2010.01)I;C12N5/0793(2010.01)I;C12M1/42(2006.01)I 主分类号 C12N13/00(2006.01)I
代理机构 西安通大专利代理有限责任公司 61200 代理人 徐文权
主权项 一种诱导骨髓间充质干细胞神经分化及增值的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取两根导电铜丝,裁剪后用磨砂纸磨去铜丝两端,然后将两根导电铜丝用贴膜固定于导电玻璃导电面的两端,固定后进行灭菌处理,备用;2)取新鲜离体肱骨,用DMEM/F12反复冲洗骨髓腔及干垢端,然后将骨髓间充质干细胞吸至离心管,离心去除上清液,加入10%FBS的DMEM/F12培养基吹打均匀,再接种至培养瓶中,培养3~5代后备用;3)将步骤2)培养的细胞接种至步骤1)处理后的导电玻璃上,培养一天后,将导电铜丝接至电刺激仪上,对细胞进行电刺激,设置电刺激参数为1.5V/cm,频率为10Hz,然后在37℃恒温培养箱中连续刺激7天,每天1h,通过免疫荧光染色和基因表达检测,得出细胞向神经元方向分化结果。
地址 710032 陕西省西安市长乐西路169号
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