| 发明名称 | 一种重组Cu/Zn-SOD的发酵制备方法 | ||
| 摘要 | 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种重组Cu/Zn-SOD的发酵制备方法。以能高效表达梅花鹿鹿茸来源Cu/Zn-SOD基因的毕赤酵母工程菌GS115-pPIC9K为生产菌株，进行种子培养；种子培养的条件为：YPD培养基，pH6.0，30℃，200r/min培养15h；然后进行发酵；发酵培养基为BMMY培养基、pH6.0，诱导产酶条件为：接种量5%，初始甲醇添加量1%，每隔24h补充1%甲醇，200r/min、30℃培养96h，重组SOD活力为1876U/mL；发酵液再经分离纯化得到电泳纯Cu/Zn-SOD。通过工程微生物的发酵生产，大量制备Cu/Zn-SOD；该方法能减少对自然资源的依赖，消除动物疾病所带来的负面影响，提高超氧化物歧化酶的应用安全性。 | ||
| 申请公布号 | CN105087510A | 申请公布日期 | 2015.11.25 |
| 申请号 | CN201510585981.5 | 申请日期 | 2015.09.15 |
| 申请人 | 福州大学 | 发明人 | 林娟;吕橄;李仁宽;叶秀云 |
| 分类号 | C12N9/02(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N | 主分类号 | C12N9/02(2006.01)I |
| 代理机构 | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人 | 蔡学俊 |
| 主权项 | 一种重组Cu/Zn‑SOD的发酵制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）以能高效表达梅花鹿鹿茸来源Cu/Zn‑SOD基因的毕赤酵母工程菌GS115‑pPIC9K为生产菌株，进行种子培养；种子培养的条件为：YPD培养基，pH6.0，30℃，200r/min培养15h；（2）然后进行发酵；发酵培养基为BMMY培养基、pH6.0，诱导产酶条件为：接种量5%，初始甲醇添加量1%，每隔24h补充1%甲醇，200r/min、30℃培养96h，重组SOD活力为1876 U/mL；（3）发酵液经陶瓷膜微滤、中空纤维柱超滤、HiTrap DEAE FF弱阴离子交换色谱柱进行分离纯化；（4）收集洗脱峰组分，利用TSK‑G3000SW进行凝胶过滤，得到电泳纯Cu/Zn‑SOD。 | ||
| 地址 | 350108 福建省福州市闽侯县上街镇大学城学园路2号福州大学新区 | ||