一种牛血清白蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种牛血清白蛋白的制备方法，属于蛋白制备技术领域。本发明的牛血清白蛋白首先通过向新鲜牛血液加入水蛭素防止血液凝固，然后将其离心分离，去除血液中部分杂质，再将血浆与氯化钠、氯化钾等混合，通过半透膜获得牛血清白蛋白，再将离心残留液与半透膜下部溶液混合，加入低温无水乙醇，搅拌析出牛血清白蛋白，将两次获得的牛血清白蛋白进行干燥，而得。本发明的有益效果是：该方法所得的产品纯度高，收率高，纯度在98～99%，收率为20～30%；成本比其他方法的成本降低了15～20%，生产效率比其他方法提高了20～30%，满足相关行业对牛血清白蛋白的质量要求。

主权项

一种牛血清白蛋白的制备方法，其特征在于具体制备方法：（1）取600～800mL新鲜牛血液放入容器中，向其中加入400～600mg水蛭素，缓慢搅拌5～10min，转速设定为100～200r/min，再将转速增加至2100～2500r/min，搅拌40～50min，温度设定为30～35℃，然后将其放入离心机中进行离心分离，收集血浆，残留液收集备用；（2）取8～10g氯化钠、0.4～0.8g氯化钾、0.2～0.4g磷酸二氢钾和1.6～2.0g磷酸二氢钾放入容器中，向其中加入400～600mL去离子水，搅拌均匀，使用质量分数为15%的盐酸溶液调节pH为7.0～7.3，将上述所收集的血浆倒入容器中，搅拌均匀，温度设定为30～35℃，静置10～15min，得混合液；（3）将上述的混合液放入离心机中离心分离10～15min，转速设定为4000～5000r/min，取上清液，在容器中部安装一半透膜，将上清液倒在半透膜上方，密封，对容器顶部加压至1～2MPa，温度设定为40～45℃，待无液体从半透膜析出时，停止加压，收集半透膜上部残留物备用；（4）将上述半透膜下部的溶液及步骤（1）所收集的残留液放入容器中，使用质量分数0.2%的磷酸氢二钾溶液调节pH为7.6～8.0，冷却至0～2℃，快速搅拌，然后向其中加入温度为－25～－20℃的无水乙醇直至其质量分数达到30～40%，保持温度为－6～－4℃，搅拌均匀，待无沉淀产生后停止搅拌，静置5～10min，过滤；（5）将上述所得的过滤物与步骤（3）中所收集的残留物混合均匀，将其放入喷雾干燥机中，进行喷雾干燥，再将干燥后所得的粉末放在紫外灯下照射10～15s，紫外线强度为1000～1600μw/cm²、波长为260～280nm，得到牛血清白蛋白，装瓶在温度为2～5℃下，保存即可。