发明名称 一种基于稀有细胞检测ALK基因状态的方法及相关试剂盒
摘要 本发明涉及一种基于稀有细胞检测ALK基因状态的方法及其试剂盒,所述方法包括以下步骤:步骤1,血液样本或体液样本,样本中包含循环肿瘤细胞或其他稀有细胞与白细胞的混合细胞群;步骤2,用缓冲液稀释样本,去除血浆,并回收CTC或其他稀有细胞;步骤3,用红细胞裂解液裂解,去除红细胞并回收CTC或其他稀有细胞;步骤4,用包被有抗人白细胞相关抗原抗体的磁微粒同步骤3所得的回收细胞混匀孵育,结合并形成磁微粒-白细胞混合体;步骤5,离心将磁微粒-白细胞混合体与其他细胞分离,得到含有CTC或其他稀有细胞及少量白细胞的混合细胞群;步骤6,使用免疫荧光细胞化学与荧光原位杂交的相结合的方法,测定CTC或其他稀有细胞的ALK基因重排的状态。
申请公布号 CN105087776A 申请公布日期 2015.11.25
申请号 CN201510441107.4 申请日期 2015.07.24
申请人 北京莱尔生物医药科技有限公司 发明人 詹厅;杨瑛杰;马妤婕
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/573(2006.01)I;G01N33/58(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 代理人 王为;孟旭
主权项 一种基于稀有细胞检测ALK基因状态的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:步骤1,从患者获得血液样本或其他含有稀有细胞的体液样本,样本中包含CTC或其他稀有细胞与白细胞的混合细胞群;步骤2,用缓冲液稀释样本,离心去除血浆,并回收CTC或其他稀有细胞;步骤3,用红细胞裂解液裂解,离心去除红细胞并回收CTC或其他稀有细胞;步骤4,用包被有抗人白细胞相关抗原抗体的磁微粒同步骤3所得的回收细胞混匀孵育,以使磁微粒同标的白细胞充分结合并形成磁微粒‑白细胞混合体;步骤5,离心将磁微粒‑白细胞混合体与其他细胞分离,得到含有CTC或其他稀有细胞及少量白细胞的混合细胞群;步骤6,使用免疫荧光细胞化学与荧光原位杂交的相结合的方法,测定CTC或其他稀有细胞的ALK重排的状态。
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