发明名称 |
一种高质量薏苡基因组DNA的提取方法 |
摘要 |
本发明公开了一种高质量薏苡基因组DNA的提取方法,它主要是在提取过程中添加了在提取液中加入无水乙醇和高盐KAc溶液的步骤,增强了去除叶片组织中多糖、生物碱、多酚等杂质的效果,在常规的除蛋白操作步骤后,对基因组DNA进行两次沉淀,进一步提升获得DNA的纯度,获得得率和质量均高的基因组DNA,尤其能满足对DNA纯度要求高的实验需求。 |
申请公布号 |
CN105087548A |
申请公布日期 |
2015.11.25 |
申请号 |
CN201510574684.0 |
申请日期 |
2015.09.11 |
申请人 |
贵州省亚热带作物研究所 |
发明人 |
付瑜华;杨成龙;刘凡值;周明强;李志芳;黎青;班秀文;蒙秋伊;敖茂宏;刘鹏飞;王建;罗凯;周祥 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
贵阳中新专利商标事务所 52100 |
代理人 |
李余江;程新敏 |
主权项 |
一种高质量薏苡基因组DNA的提取方法,其特征在于:取在液氮中充分研磨的薏苡叶片迅速放入提取液中,混匀后置于水浴中;冷至室温后加入无水乙醇和KAc溶液,涡旋混匀;加入等体积的氯仿/异戊醇混合液抽提,进行低温离心处理;取上清液,加入等体积的氯仿/异戊醇混合液进行第二次抽提,第二次进行离心处理后获得第二次上清液;将二次离心上清液加入CTAB沉淀缓冲液,混匀后室温静置,然后第三次进行离心处理;将沉淀溶于NaCl溶液中加入预冷的无水乙醇,絮状沉淀析出后挑出并用70%乙醇洗涤两次,风干后溶于TE溶液中。 |
地址 |
562400 贵州省黔西南布依族苗族自治州兴义市下五屯峰林东路1号 |