煤制油废水COD降解用菌种驯化试剂盒及驯化方法

摘要

一种煤制油废水COD降解用菌种驯化试剂盒及驯化方法，试剂盒包括富集管、驯化预制管A、驯化预制管B；驯化方法包括缺氧驯化和好氧驯化。该试剂盒是通过本实验室在全国大量采集煤制油废水样品，对废水成分进行分析，并通过实验配制出了一种可以模拟真实污水的驯化培养基，并以此为基础形成了试剂盒。该驯化培养基具有较强的适应性，经本试剂盒驯化后的菌种投放到多个煤制油废水中，COD降解能力均有所提高，大大缩短污水处理启动时间，该试剂盒可模拟缺氧、好氧生物法工艺，可应用于煤制油污水处理菌剂的产品优化，以及污水厂在运行前对污泥进行快速驯化。

主权项

一种煤制油废水COD降解用菌种驯化试剂盒，其特征在于：它是由富集管、驯化预制管A、驯化预制管B组成；其中：(一)、富集管：富集管的制备：(1)、取牛肉膏0.7‑1.0g，蛋白胨0.7‑1.0g，磷酸二氢钾1.2‑2.0g，磷酸氢二钠1.5‑2.5g，用1L水溶解，以上培养基用浓度5％的碳酸钠和5％HCl调pH至7.00‑7.50，分装到50ml螺口管中，每支管加入培养基20ml；分装完毕后，将螺口管盖拧松，115℃灭菌25‑30min，待灭菌结束并冷却至室温后，从灭菌锅中取出并拧紧管盖，至此基础富集管制备完成；(2)、取苯酚10‑13mg，萘酚2‑4mg，喹啉1‑2mg，甲醇0.08‑0.12ml，丁醇0.08‑0.12ml，用100ml无菌水溶解，溶解后在无菌条件下用0.22μm无菌滤膜过滤除菌；过滤除菌完成后，取2ml经过过滤除菌的溶液，0.2‑0.3μl煤制柴油，在无菌条件下加入到步骤(1)中的基础富集管中，在高速漩涡震荡器上震荡5‑10min，至此富集管制备完成；(二)、驯化预制管A：驯化预制管A的制备：(1)、取牛肉膏0.4‑0.7g，蛋白胨0.4‑0.7g，丙三醇0.4‑0.6ml，磷酸二氢钾1.2‑2.0g，磷酸氢二钠1.5‑2.5g，用1L水溶解，以上培养基用浓度5％的碳酸钠和5％HCl调pH至7.50‑8.00，分装到50ml螺口管中，每支管加入培养基30ml；分装完毕后，将螺口管盖拧松，115℃灭菌25‑30min，待灭菌结束并冷却至室温后，从灭菌锅中取出并拧紧管盖，至此基础驯化预制管A制备完成；(2)、取苯酚18‑22mg，萘酚8‑12mg，喹啉4‑6mg，苯胺4‑6mg，吡啶0.4‑0.6mg，辛基十二烷醇0.1‑0.2mg，用100ml无菌水溶解，溶解后在无菌条件下用0.22μm无菌滤膜过滤除菌，过滤除菌后的溶液为水添加物A；(3)、取萘130‑170mg，甲苯3‑7mg，邻苯二甲酸二丁酯2‑3mg，苯并咪唑2‑3mg，甲醇0.08‑0.12ml，丁醇0.08‑0.12ml，用100ml 75％乙醇溶解，此溶液为醇添加物A；(4)、分别取水添加物A 3ml，醇添加物A 0.012ml，煤制柴油1.0‑1.2μl，在无菌条件下装到步骤(1)中的基础驯化预制管A中，在高速漩涡震荡器上震荡5‑10min，至此驯化预制管A制备完成；(三)、驯化预制管B：驯化预制管B的制备：(1)、取牛肉膏0.2‑0.4g，蛋白胨0.2‑0.4g，丙三醇0.6‑0.8ml，磷酸二氢钾1.2‑2.0g，磷酸氢二钠1.5‑2.5g，用1L水溶解，以上培养基用浓度5％的碳酸钠和5％HCl调pH至7.50‑8.00，分装到50ml螺口管中，每支管加入培养基30ml；分装完毕后，将螺口管盖拧松，115℃灭菌25‑30min，待灭菌结束并冷却至室温后，从灭菌锅中取出并拧紧管盖，至此基础驯化预制管B制备完成；(2)、取苯酚150‑170mg，萘酚18‑22mg，喹啉9‑12mg，苯胺10‑12mg，吡啶0.9‑1.2mg，辛基十二烷醇0.4‑0.6mg，用100ml无菌水溶解，溶解后在无菌条件下用0.22μm无菌滤膜过滤除菌，过滤除菌后的溶液为水添加物B；(3)、取萘540‑560mg，甲苯18‑22mg，邻苯二甲酸二丁酯8‑12mg，苯并咪唑8‑12mg，甲醇1.8‑2.2ml，丁醇1.8‑2.2ml，用100ml 75％乙醇溶解，此溶液为醇添加物B；(4)、分别取水添加物B 3ml，醇添加物B 0.012ml，煤制柴油3.0‑4.0μl，在无菌条件下装到步骤(1)中的基础驯化预制管B中，在高速漩涡震荡器上震荡5‑10min，至此驯化预制管B制备完成。