一种蒲公英多糖的提取方法及其应用

摘要

本发明公开了一种蒲公英多糖的提取方法及其应用，提取方法简单，提取率为8.58%，纯度为86.3%，用环己酮沉淀蛋白，去除提取液中的蛋白质，去除率高，能够明显提高多糖提取液的纯度，而且使用量少，节约成本；将蒲公英粉碎后过筛，提高粉碎度，细胞的破碎程度高，提高提取率；用热水代替乙醇进行回流提取，减少提取液中的脂肪含量，提高多糖的纯度，降低成本；利用DEAE-52纤维素层析柱和SephadexG-100凝胶层析柱对粗多糖进行分离纯化，减少纯化过程中对多糖的浪费，提高提取率；蒲公英多糖可作为抗氧化活性成分用于制备保健食品或药品，抗氧化作用明显，安全，无副作用，具有很大的市场价值和广阔的应用前景。

主权项

一种蒲公英多糖的提取方法，其特征在于，其具体步骤为：（1）将全草蒲公英洗净，晾干，45℃烘干，粉碎，过60~100目筛；（2）取蒲公英干粉100g，按料液比1:8~12，加入去离子水，95~100℃水浴，回流4~5次，每次1小时，过滤，得提取液；（3）向提取液中缓慢加入环己酮，边加入边搅拌，至加入量为提取液体积的8~12%，1000转/分钟，磁力搅拌20~30分钟，静置140~160分钟，10000转/分钟，离心10分钟，取上清，40~45℃真空旋转蒸发至原体积的1/3，收集环己酮，重复使用；（4）向3）得到的上清中加入无水乙醇，边加入边搅拌，至乙醇体积占总体积的85%，置于4℃冰箱中，静置过夜，8000转/分钟，离心15分钟，取沉淀；（5）向4）得到的沉淀中加入3~4倍量的去离子水，真空旋转浓缩至无乙醇，得粗多糖溶液；（6）将粗多糖溶液倒入7000道尔顿的透析袋中，将透析袋置于装满去离子水的烧杯中，4℃透析36~48小时，更换烧杯中的去离子水3~4次，透析袋可以重复使用；（7）将透析后的粗多糖溶液以0.5ml/min的速率上样于DEAE‑52纤维素层析柱，依次用1mol/L的NaCl溶液及去离子水洗脱，分管收集，收集液用苯酚‑硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线收集各部位多糖洗脱液，DPPH法测定各部位多糖的抗氧化活性，旋转蒸发浓缩后真空冷冻干燥；（8）将经DEAE‑52纤维素层析柱初步分离纯化的各部位多糖用去离子水配制成5mg/ml的溶液，吸取2ml上样于SephadexG‑100凝胶层析柱，用去离子水进行洗脱，分管收集，收集液用苯酚‑硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，合并糖峰洗脱液，旋转蒸发浓缩后真空冷冻干燥，得纯化蒲公英多糖。