基于胶原水凝胶构建体内肿瘤工程化人卵巢癌肿瘤模型

摘要

本发明公开了一种基于可注射型胶原水凝胶复合人卵巢癌细胞于裸鼠皮下以注射形式无创性构建体内肿瘤工程化人卵巢癌肿瘤模型的应用研究。首次以可注射型胶原水凝胶支架为基底材料，复合人卵巢癌细胞SKOV3于裸鼠皮下无创性构建体内肿瘤工程化人卵巢癌肿瘤模型，并与传统的无支架材料条件下单独注射细胞方式构建的人卵巢癌肿瘤模型对比，通过对肿瘤模型进行检测，结果表明，基于可注射型胶原水凝胶构建的人卵巢癌肿瘤恶性程度更高，与人体卵巢癌肿瘤更为接近，且这种方式构建的体内肿瘤模型创伤性小。采用该法构建的肿瘤模型成瘤性好，成瘤率达到95%，相比于传统的方式提高了15%左右，对于进一步的研究提供更为可靠的肿瘤模型。

主权项

一种体内肿瘤工程化人卵巢癌肿瘤模型的构建方法，其特征是所述的体内工程化人卵巢癌肿瘤模型是按照以下方法构建的：1）人卵巢癌肿瘤细胞的获取：人卵巢癌肿瘤细胞SKOV3购置于ATCC；SKOV3复苏后，加入含有10%的胎牛血清的DMEM完全培养液，37℃、5% CO₂培养箱培养，24小时后换液，继续培养，传代4‑6次扩增细胞数量；2）材料配制：采用从新生小牛牛皮中提取的型胶原水凝胶，用0.5M的冰乙酸，4℃缓慢溶解配制成7mg/mL，使用时用1M的NaOH调成PH值为中性，37℃条件下放置4~5分钟以上由液相变为固相凝胶；3）将细胞接种于支架材料：把已经扩增的SKOV3细胞用0.25%的胰蛋白酶消化下来，离心去上清，再加入液状胶原水凝胶，浓度为10⁷个细胞/mL；4）裸鼠移植瘤的构建：把细胞—材料复合体以200μL量注射于6‑8周大的裸鼠左右侧腋部皮下，形成一小丘表示接种成功，体内植入30天，构建体内肿瘤工程化卵巢癌肿瘤模型；5) 获得的肿瘤成瘤率在95%以上，相比于传统的仅注射细胞的方式提高了15%。