一种促进人皮肤成纤维细胞向成骨细胞转分化的培养系统

摘要

本发明基于外源导入骨组织细胞特异性表达的转录因子Runx2到人皮肤成纤维细胞的方法，开发了一套促进成纤维细胞各阶段分化的培养系统，有效促进向成骨细胞的转化，属细胞生物学与组织工程领域。本系统包含三套培养液，分别作用转分化过程中的三个关键阶段：a,维持RUNX2阳性细胞的高存活率和增值;b,调控RUNX2在特定时间内的表达；c,细胞重编程后，提高细胞向成骨细胞的转化效率，缩短转化时间。从而实现人皮肤成纤维细胞向成骨细胞方向的转分化。三套培养液之间相互配合，根据细胞最后的使用目的，分别作用时间可以灵活调控，能够培养较大规模的诱导性成骨细胞。用于骨代谢性疾病，骨折等的细胞治疗。本发明的药物组合也可用于组织工程骨的研发和生产。为基础研究带来便捷，为临床应用带来前景。

主权项

一种促进人皮肤成纤维细胞向成骨细胞转分化的培养系统，其特征是在外源转入骨组织细胞特异性表达的转录因子Runx2后, 培养系统通过特定的三套培养液进行培养,让三套培养液分别作用转分化三个关键阶段过程：a、第一套培养液（TraA）用于维持RUNX2阳性细胞的高存活率和增值，得到一定量的Runx2的阳性细胞，以获得更多的诱导性成骨细胞；b、第一套培养液（TraB）调控RUNX2在特定时间内的表达，维持稳定的RUNX2的表达和碱性磷酸酶（ALP）的形成，促进人皮肤成纤维细胞向成骨前体细胞重编程；c、 第三套培养液（TraC）在细胞重编程后，提高细胞向成骨细胞的转化效率，缩短转化时间，提高人皮肤成纤维细胞向成骨细胞方向的转分化，20天以内可以看到诱导的细胞形成明显的矿化结节。