EV71 3C蛋白酶作用靶点检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种EV71 3C蛋白酶作用靶点检测试剂盒，包括3C蛋白、多肽底物，以及酶解反应缓冲液，所述3C蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示；所述多肽底物为Dabcyl-EALFQGPPKFE-Edans。本发明还公开了一种EV71 3C蛋白酶作用靶点检测方法：将待检测化合物、3C蛋白加入到酶解反应缓冲液中，然后加入多肽底物，混匀，在336nm波长激发下，检测其在490nm处的荧光强度；若检测不到荧光，则表明该待检测化合物能抑制3C蛋白；若能够检测到荧光，则表明该待检测化合物不能抑制3C蛋白。本发明的检测试剂盒及方法，可有效对待检测化合物的抗EV71能力进行检测，方法简便，易行，特异性及灵敏性高。

主权项

一种EV713C蛋白酶作用靶点检测试剂盒，其特征在于：包括3C蛋白、多肽底物，以及酶解反应缓冲液，所述3C蛋白的序列如下(如SEQ ID NO.1所示)：GPSLDFALSLLRRNIRQVQTDQGHFTMLGVRDRLAVLPRHSQPGKTIWVEHKLVNVLDAVELVDEQGVNLELTLITLDTNEKFRDITKFIPENISTASDATLVINTEHMPSMFVPVGDVVQYGFLNLSGKPTHRTMMYNFPTKAGQCGGVVTSVGKVVGIHIGGNGRQGFCAGLKRSYFASEQ；所述多肽底物为Dabcyl‑EALFQGPPKFE‑Edans，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，N端连接Dabcyl基团，C端连接Edans基团。