一种豆状囊尾蚴囊液蛋白的分离纯化和免疫原性检测的方法

摘要

本发明公开了一种豆状囊尾蚴囊液蛋白的分离纯化和免疫原性检测的方法，包括超滤离心管的预处理、囊液蛋白的处理、离心处理、收集大分子量目的蛋白和小分子量目的蛋白，并对纯化的分子量大小不同的囊液蛋白进行抗原性检测等步骤。本发明操作简单，时程短，效率高，作用超滤膜更加灵敏准确，获取的纯化蛋白浓度更高更纯，蛋白回收量大，并能获得抗原性强的纯化蛋白。本法是比较理想的分离纯化囊液蛋白及检测纯化蛋白免疫原性的新方法。

主权项

一种豆状囊尾蚴囊液蛋白的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、取100kDa的超滤管、50kDa的超滤离心管各两个，分别用超纯水润洗干净后，倒满超纯水，置于4℃冰箱内，预冷5‑10min；S2、取1200μL全囊液蛋白与等体积的超纯水混合均匀后，得2400μL样品；S3、提前开启离心机降温至4℃，将预处理好的两个100kDa的超滤离心管取出，弃去管内超纯水，各自加入1200μL样品，离心处理30‑35mi n；S4、离心后，取出超滤离心管，吸取500μL超纯水吹20‑30，将位于超滤管内管里的大于100kDa的蛋白收集于干净的小离心管内，‑80℃保存备用，并将位于超滤管的外管内的小于100kDa的蛋白直接收集于干净的10mL离心管内；S5、提前开启离心机降温至4℃，将预处理好的两个50kDa的超滤离心管取出，弃去管内超纯水，分别加入等量的步骤S4收集的小于100kDa的蛋白，离心处理30‑35min后，用500μL超纯水30‑40次吹打50‑100kDa的样品，收集于小离心管内，‑80℃保存备用，并将小于50kDa的蛋白直接收集于10mL离心管内，‑80℃保存备用。