一种基于氧化石墨烯/纳米金的氨基酸快速光学检测方法

摘要

本发明公开了一种基于氧化石墨烯/纳米金的氨基酸快速光学检测方法，通过一步法合成了氧化石墨烯/纳米金复合物，并利用其对谷氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸光学响应的特点成功将其用于这三种氨基酸的快速检测。通过一分钟混合振荡，该方法即可对不同浓度的这三种待测氨基酸表现出不同位置的吸收度比值的浓度依赖变化，进而完成对不同浓度、不同种类氨基酸的快速检测。本发明检测方法步骤简单、操作简便、成功率高、检测稳定性好，且易于推广使用。

主权项

一种基于氧化石墨烯/纳米金的氨基酸快速光学检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)氧化石墨烯纳米片分散液的配置：取氧化石墨烯粉末分散在去离子水中，获得1mg/mL的氧化石墨烯分散液，然后进行冰水浴超声30分钟，再以3000r.p.m.的速度离心30分钟，取上清液，即得氧化石墨烯分散液；(2)氧化石墨烯/纳米金复合物的合成：所有待用的玻璃器皿需要先用王水浸泡10分钟，以防引入杂质影响合成；然后将1.225mL质量分数1％的氯金酸溶液和3mL氧化石墨烯分散液混合静置30分钟后不停搅拌并加热至80℃；再向混合液中一次性加入2.1mL质量分数1％的柠檬酸钠溶液，继续在80℃下搅拌加热1小时；之后，先停止加热，再搅拌15分钟后将获得的溶液避光放凉至室温，然后以3000r.p.m.的速度离心10分钟并取上清液，即得氧化石墨烯/纳米金复合胶体溶液，置于4℃冷藏备用；(3)标准浓度依赖曲线的建立：将谷氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸三种氨基酸分别配置10^‑3mol/L～0.1mol/L之间的任意五种浓度的氨基酸标准样品溶液，分别将0.2mL的这些溶液与2mL氧化石墨烯/纳米金复合胶体溶液混合，即溶液体积比10:1，并以2800r.p.m.振荡一分钟，然后将得到的混合液加入光谱仪比色皿，设置积分时间为100ms，扫描范围为400nm～800nm，对这些氨基酸标准样品溶液进行可见光吸收度检测，每个浓度重复测量5次，之后以每种浓度的这些溶液在680nm与528nm的吸收度比值的平均值为纵坐标，以溶液浓度为横坐标绘制标准浓度依赖曲线，作为后续氨基酸检测的标定曲线；(4)基于氧化石墨烯/纳米金的氨基酸快速光学检测：取0.2mL待测氨基酸溶液与2mL氧化石墨烯/纳米金复合胶体溶液混合，所述待测氨基酸溶液为谷氨酸、天冬氨酸或半胱氨酸中的一种，重复步骤3的测量步骤测量3‑5次，得到该溶液稳定的特征光谱及其在680nm与528nm稳定的吸收度比值，当待测溶液已知种类未知浓度时，将该吸收度比值代入步骤3得到的对应的氨基酸标准浓度依赖曲线，得到对应浓度，即完成待测溶液的浓度检测；而当待测溶液已知浓度(10^‑3mol/L～0.1mol/L之间)未知种类时，将得到的吸收度比值和浓度同时代入三种标准浓度依赖曲线，该点距离最近的曲线对应的氨基酸种类即为该溶液的氨基酸种类，即完成待测溶液氨基酸种类检测，综上即完成基于氧化石墨烯/纳米金的氨基酸快速光学检测过程。