发明名称 一种抑制鸡细胞周期蛋白F基因表达的shRNA分子序列及其应用
摘要 本发明涉及针对鸡细胞周期蛋白F基因,构建抑制该基因表达效率最佳的shRNA慢病毒干扰载体。针对鸡细胞周期蛋白F基因设计的4个shRNA寡核苷酸序列,克隆到慢病毒干扰载体lentiviral vector中,构建出四个干扰载体,与包装质粒共转染293T细胞,上清培养液过滤后到病毒悬液,测定病毒滴度后以一定MOI病毒量感染鸡胚成纤维细胞系和鸡胚睾丸支持细胞,筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体。在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了鸡细胞周期蛋白F基因的表达。
申请公布号 CN105039343A 申请公布日期 2015.11.11
申请号 CN201510477667.5 申请日期 2015.08.06
申请人 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 发明人 孙研研;陈继兰;富丽;薛夫光
分类号 C12N15/113(2010.01)I;C12N15/867(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I 主分类号 C12N15/113(2010.01)I
代理机构 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 代理人 王安娜;李翔
主权项 一种作用于鸡细胞周期蛋白F基因的shRNA分子序列,所述shRNA分子序列的单链寡核苷酸序列为GCAGAAGTGAATGGATTAAAGTTCAAGAGACTTTAATCCATTCACTTCTGCTT。
地址 北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院北京畜牧兽医研究所