发明名称 |
一种抑制鸡细胞周期蛋白F基因表达的shRNA分子序列及其应用 |
摘要 |
本发明涉及针对鸡细胞周期蛋白F基因,构建抑制该基因表达效率最佳的shRNA慢病毒干扰载体。针对鸡细胞周期蛋白F基因设计的4个shRNA寡核苷酸序列,克隆到慢病毒干扰载体lentiviral vector中,构建出四个干扰载体,与包装质粒共转染293T细胞,上清培养液过滤后到病毒悬液,测定病毒滴度后以一定MOI病毒量感染鸡胚成纤维细胞系和鸡胚睾丸支持细胞,筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体。在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了鸡细胞周期蛋白F基因的表达。 |
申请公布号 |
CN105039343A |
申请公布日期 |
2015.11.11 |
申请号 |
CN201510477667.5 |
申请日期 |
2015.08.06 |
申请人 |
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
发明人 |
孙研研;陈继兰;富丽;薛夫光 |
分类号 |
C12N15/113(2010.01)I;C12N15/867(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/113(2010.01)I |
代理机构 |
北京风雅颂专利代理有限公司 11403 |
代理人 |
王安娜;李翔 |
主权项 |
一种作用于鸡细胞周期蛋白F基因的shRNA分子序列,所述shRNA分子序列的单链寡核苷酸序列为GCAGAAGTGAATGGATTAAAGTTCAAGAGACTTTAATCCATTCACTTCTGCTT。 |
地址 |
北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |