一种溶解池塘颤藻的蜡样芽孢杆菌制剂的工业化多级联通液体发酵方法

摘要

本发明公开了一种溶解池塘颤藻的蜡样芽孢杆菌制剂的工业化液体发酵生产方法。以菌剂工业化液体发酵系统为平台，以保证溶藻菌制剂产品的生长性能和溶藻特性为目标，建立从种子液培养、多级联通发酵罐培养、菌泥制备及载体复合、干燥、粉碎和包装的产品生产工艺流程，提出了溶解颤藻蜡样芽孢杆菌制剂的工业化液体发酵生产的系统解决方案，并形成了相关菌剂产品。该方法可满足本菌剂产品的工业化液体发酵生产需求，另一方面保证本发明形成的蜡样芽孢杆菌制剂产品并未因工业化和规模化的生产致使其溶藻特性和生长特性受到影响，仍具有良好的颤藻溶解专一性，对优良绿藻和硅藻无溶解效应，对养殖对虾也无不良影响，菌剂产品可用于养殖生产应用。

主权项

一种溶解池塘颤藻的蜡样芽孢杆菌制剂的工业化多级联通液体发酵方法，其特征是包括以下步骤：(1)确定蜡样芽孢杆菌CZBC1的多级联通发酵罐培养的发酵培养基；(2)活化培养：将保种的蜡样芽孢杆菌CZBC1菌种进行活化培养，得活化的蜡样芽孢杆菌CZBC1；(3)摇瓶种子液培养：将步骤(2)中活化好的蜡样芽孢杆菌CZBC1置于种子瓶中，恒温振荡培养，得摇瓶种子液；(4)多级联通发酵罐培养：多级联通发酵罐的大小依次为50L、500L和5000L，每个发酵罐中装有步骤(1)中确定的发酵培养基，首先将摇瓶种子液接种到50L发酵罐中进行发酵培养至菌种浓度达到10⁹cfu/mL以上，接着取50L发酵罐中的种子液接种到500L发酵罐中继续培养至菌种浓度达到10⁹cfu/mL以上，最后取500L发酵罐中的种子液接种到5000L发酵罐中继续培养至芽孢数量达到10¹⁰个/mL以上，且芽孢的获得率达到95％以上时，将发酵液引入离心机；(5)菌泥制备及载体复合：将发酵液引入离心机离心后，取菌泥，将菌泥与载体混匀后经包括干燥、粉碎、包装和抽检工序处理后，得蜡样芽孢杆菌制剂产品。