一种同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白在制备治疗或预防EV71感染药物中的应用

摘要

本发明公开一种同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白在制备治疗或预防EV71感染药物中的应用，其步骤是：A.利用pCMV-Tag-Flag2B载体构建pCMV-HERP质粒；B.EV71病毒的VP1结构蛋白和3C非结构蛋白作为EV71病毒复制的检测标志物，并针对VP1蛋白基因设计了荧光定量检测引物；C.时间梯度实验。表达HERP蛋白能够明显抑制EV71病毒VP1的mRNA水平，随着HERP质粒浓度的提高呈现梯度降低的剂量依赖效应。免疫印迹实验也显示了VP1和3C蛋白的表达水平也随着HERP蛋白表达量的提高而降低。

主权项

一种同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白在制备治疗或预防EV71感染药物中的应用，其步骤是：A、利用pCMV‑Tag‑Flag2B载体构建pCMV‑HERP质粒；B、在对EV71病毒敏感的人恶性胚胎横纹肌肉瘤细胞中过表达了构建的pCMV‑HERP表达质粒，24小时后用一定量的EV71病毒感染，EV71病毒的VP1结构蛋白和3C非结构蛋白作为EV71病毒复制的检测标志物，并针对VP1蛋白基因设计了荧光定量检测引物；C、时间梯度实验，转染空载pCMV‑Tag‑Flag2B载体和pCMV‑HERP质粒24小时后分别感染EV71病毒4小时、8小时、12小时和24小时后收样提取总RNA并检测VP1的mRNA水平，同时检测病毒蛋白水平。