发明名称 恩诺沙星抗原合成方法及恩诺沙星-IgY抗体制备方法
摘要 本发明涉及一种恩诺沙星抗原合成方法及恩诺沙星-IgY抗体制备方法。恩诺沙星抗原合成方法,包括(1)分别称取5mg恩诺沙星、10mgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中,搅拌获得反应液,将反应液以离心去沉淀制成恩诺沙星活化中间产物;(2)称取10mg的牛血清白蛋白溶于5ml的PBS中,边搅拌边将恩诺沙星活化中间产物逐滴加入到溶液中;(3)将反应液置于透析袋中;(4)将透析袋内液体离心,去沉淀,即得到恩诺沙星抗原。恩诺沙星-IgY抗体制备方法,所包括以下步骤(1)合成恩诺沙星抗原,(2)制备含抗体的免疫蛋,(3)将收集的蛋分离,得到卵黄和卵清,提取卵黄获得恩诺沙星-IgY抗体。
申请公布号 CN105037524A 申请公布日期 2015.11.11
申请号 CN201510482780.2 申请日期 2015.08.07
申请人 西北农林科技大学 发明人 张小莺;江雪梅
分类号 C07K14/765(2006.01)I;C07K1/107(2006.01)I;C07K16/44(2006.01)I;C07K16/02(2006.01)I 主分类号 C07K14/765(2006.01)I
代理机构 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 代理人 仲伯煊
主权项 恩诺沙星抗原合成方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)分别称取5mg恩诺沙星、10mgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中,室温下在磁力搅拌器上搅拌24h,获得反应液,将反应液以2000r/min离心10min,去沉淀,制成恩诺沙星活化中间产物;(2)称取10mg的牛血清白蛋白,溶于5ml的pH为7.4的PBS中,在磁力搅拌器上边搅拌边将步骤(1)得到的恩诺沙星活化中间产物逐滴加入到牛血清白蛋白‑PBS溶液中,室温下在磁力搅拌器上搅拌12~16h得到反应液;(3)将步骤(2)得到的反应液置于透析袋中,透析袋的透析液PBS,4℃透析48h,每隔8h换透析液一次;(4)透析结束后,将透析袋内液体离心,去沉淀,即得到恩诺沙星抗原。
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