主权项 |
一种辣椒花药培养直接成苗方法,选取杂交一代辣椒品种,在开花盛期选取处于单核靠边期的花蕾,并装入自封袋中置于4 ℃环境中1~3 d,然后对花蕾进行消毒并剥取花药,将所获得花药接种于培养基中进行花药培养形成胚状体,所述培养基是通过在基本培养基中添加外源物质所制得的,其特征在于:所述的培养基制作和花药接种、培养方法,并且,经花药培养出现胚状体之后,再进行胚状体培养,最终使其形成根叶芽俱全的再生植株;其中,所述培养基的制作方法为:分别选择MS培养基和SNGM培养基作为两种基本培养基,其中以MS培养基为基本培养基制得M培养基,以SNGM培养基为基本培养基制得S培养基,M培养基和S培养基中添加的外源物质相同,均为各自培养基重量3%的麦芽糖、0.8%的琼脂、0.25%的活性炭、4 mg/L的NAA以及1~2 mg/L的6‑BA,并且,M培养基和S培养基的pH均为6.0,再将M培养基和S培养基于121 ℃、1.1 MPa条件下灭菌20 min后,冷却至60~70 ℃,对M培养基和S培养基分别进行分装,每100 mL三角瓶中倒入30 mL的M培养基或S培养基;所述的花药接种与培养的方法为:(1)花药接种:将所获得的花药接种在盛有M培养基的三角瓶中,每瓶接种5~6枚花药,将三角瓶封口;(2)花药培养:将上述接种后的三角瓶放在35 ℃的培养箱中暗培养,7 d后,再将其进行光照培养,光照强度为2500 Lx,温度为25 ℃,待三角瓶中的花药膨大后,将膨大的花药转接于S培养基中,然后置于25 ℃培养室中进行暗培养,至胚状体出现;所述的胚状体培养方法为:对花药培养所产生的胚状体再进行弱光照培养,光照强度为2000 Lx,每天光照10 h,直至形成根叶芽俱全的再生植株。 |