一种淀粉诱导型重组枯草芽孢杆菌及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种淀粉诱导型重组枯草芽孢杆菌及其制备方法与应用。该淀粉诱导型重组枯草芽孢杆菌含有重组载体，重组载体为在PHT43质粒的BamHI酶切位点前通过连续三次重叠PCR方式将Pgrac启动子替换成α-淀粉酶启动子PamyQ，然后在BamHI酶切位点后插入麦芽寡糖基海藻糖合成酶-麦芽寡糖基海藻糖水解酶融合酶基因。本发明所用的α-淀粉酶启动子和淀粉酶信号肽与表达基因麦芽寡糖基海藻糖合成酶-麦芽寡糖基海藻糖水解酶融合酶基因结合时，淀粉诱导其表达效果优于其它诱导型表达效果。

主权项

一种重组载体，其特征在于，在PHT43质粒的BamHI酶切位点前通过连续三次重叠PCR方式将Pgrac启动子替换成α‑淀粉酶启动子PamyQ，然后在BamHI酶切位点后插入麦芽寡糖基海藻糖合成酶‑麦芽寡糖基海藻糖水解酶融合酶基因；所述的α‑淀粉酶启动子PamyQ核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，麦芽寡糖基海藻糖合成酶‑麦芽寡糖基海藻糖水解酶融合酶核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；麦芽寡糖基海藻糖合成酶‑麦芽寡糖基海藻糖水解酶融合酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。