一种利用菌株MQO-154制备精氨酸酶的方法

摘要

本发明涉及一种利用菌株MQO-154制备精氨酸酶的方法，步骤如下：(1)斜面培养：将菌株MQO-154在无菌条件下接种到斜面培养基上进行培养；(2)种子扩大培养：从步骤(1)的斜面培养基上挑取菌落，加水稀释获得菌体溶液，稀释后的浓度为3×10⁵-5×10⁵个/mL，将菌体溶液接种到种子培养基上进行扩大培养；(3)发酵培养：将扩大培养后的菌体接种到发酵液体培养基中，培养后得到含精氨酸激酶的发酵培养液；(4)30L发酵罐培养：将步骤(3)中发酵培养后的发酵液接种到30L发酵罐的培养基中，发酵后得含有精氨酸酶菌体。

主权项

一种利用菌株MQO‑154制备精氨酸酶的方法，其特征在于，步骤如下：(1)斜面培养：将菌株MQO‑154在无菌条件下接种到斜面培养基上进行培养，培养温度为33℃，培养时间为24h；(2)种子扩大培养：从步骤(1)的斜面培养基上挑取菌落，加水稀释获得菌体溶液，稀释后的浓度为3×10⁵‑5×10⁵个/mL，将菌体溶液接种到种子培养基上进行扩大培养，接种量为10％(v/v)，扩大培养的温度为33℃，培养时间为24h；0‑10h，摇床转速100r/min，10‑20h，摇床转速120r/min，20‑24h，摇床转速100r/min；(3)发酵培养：将扩大培养后的菌体接种到发酵液体培养基中，接种量为10％(v/v)，接种时菌体溶液的浓度为3×10⁵‑5×10⁵个/mL，于33℃，170r/min的摇床上发酵24h，得到含精氨酸酶的发酵培养液；(4)30L发酵罐培养：将步骤(3)中发酵培养后的发酵液接种到30L发酵罐的培养基中，接种量为10％(v/v)，接种时菌体溶液的浓度为3×10⁵‑5×10⁵个/mL，控制罐压强为0.05MPa，在33℃条件下培养28h，搅拌转速为600‑800rpm，风量为1：0.8，控制溶氧量为30‑40％，全程用无菌饱和氨水控制pH为6.7‑7.0，中途补糖控制残糖为1％，放罐残糖为0％，发酵后得精氨酸酶。