一种重组人表皮生长因子的纯化方法

摘要

本发明属于蛋白质纯化领域，涉及了一种重组人表皮生长因子（rhEGF）的纯化方法，将含有rhEGF的离心上清液依次经过Ni Sepharose亲和层析、Source 15RPC反相层析、Source30Q离子交换层析得到高活性、高纯度的rhEGF蛋白。本发明创造性的采用Ni Sepharose亲和层析纯化不含HIS纯化标签的天然结构重组人表皮生长因子蛋白，具有工艺简单、活性收率高和易于规模化放大生产等特点。

主权项

一种重组人表皮生长因子的纯化方法，其特征在于，包括下述纯化步骤：（1）Ni Sepharose亲和层析：待Ni Sepharose层析柱用平衡缓冲液平衡后，将pH7.5‑8.5的含有重组人表皮生长因子的培养液离心上清上样，平衡缓冲液复平衡后，用含20mmol/L咪唑的平衡缓冲液洗脱目的蛋白；（2）Source 15RPC反相层析：待Source 15RPC反相层析柱用平衡缓冲液平衡后，将步骤（1）目的蛋白洗脱液上样，平衡缓冲液复平衡后，用洗脱液Ⅰ洗脱杂质蛋白，用洗脱液Ⅱ洗脱目的蛋白；（3）Source 30Q离子交换层析：待Source 30Q离子交换层析柱用平衡缓冲液平衡后，将步骤（2）目的蛋白洗脱液上样，平衡缓冲液复平衡后，用浓缩缓冲液洗脱，即得目的蛋白原液。