莫氏立克次体及恙虫病东方体双重实时荧光定量PCR检测体系及检测方法

摘要

本发明公布了一种莫氏立克次体及恙虫病东方体双重实时荧光定量PCR检测方法及检测体系，检测体系由引物、探针、TaqMan mix buffer、ddH₂O、pMD18-T-Rm、pMD18-T-Ot组成。引物包括Pr47F、Pr47 R、Ot-F、Ot-R，探针包括Probe-P、Probe-O。该引物和探针具有特异性好、敏感性高等特点，该检测方法与普氏立克次体、立氏立克次体、Q热立克次体等均无交叉反应；可同时检测到8.24个拷贝的莫氏立克次体标准品和43.6个拷贝的恙虫病东方体标准品。本发明可同时对莫氏立克次体及恙虫病东方体进行检测，适合国境口岸卫生检疫部门开展对上述病原体的监测检测工作。

主权项

莫氏立克次体及恙虫病东方体双重实时荧光定量PCR检测体系，其特征是：包括莫氏立克次体和恙虫病东方体的引物和探针，其中，莫氏立克次体引物及Taqman‑MGB探针序列：上游引物Pr47F：5’‑TGTTGATGGTGCAGGATTTGA ‑3’下游引物Pr47R：5’‑CGAATTTGTAGCGACAGGAAG A ‑3’探针Probe‑P：5’‑ FAM ‑ CAAACTGGCGCTGGTGT ‑3’恙虫病东方体引物及Taqman‑MGB探针序列：上游引物Ot‑F：5’‑TCT RCR CCAGTAATYATTCCTCC‑3’    R=A/G  Y=T/C下游引物Ot‑R：5’‑TGTTAATTGCTAGTGCAATGTCTGC‑3’探针Probe‑O：5’‑HEX‑AAGGACCACACTCTAAT‑3’。