发明名称 CIK细胞培养方法
摘要 本发明提供了一种CIK细胞培养方法。本发明采用新因子体系进行CIK细胞培养,细胞扩增比例超过使用传统扩增方法所获得的比例,且因子的使用量较小,降低了细胞培养成本,增加了培养效果的稳定性。本发明简单易行,成本低廉,使用效果好。
申请公布号 CN105018423A 申请公布日期 2015.11.04
申请号 CN201510277069.3 申请日期 2015.05.27
申请人 贵州北科泛特尔生物科技有限公司 发明人 边曙光
分类号 C12N5/0783(2010.01)I 主分类号 C12N5/0783(2010.01)I
代理机构 贵阳中新专利商标事务所 52100 代理人 李亮;程新敏
主权项 一种CIK细胞培养方法,其特征在于:从已经取得的外周血100ml中,用生理盐水悬浮的方式分离出单个核细胞,并种植于T75培养瓶中,加入20mlAIM‑V培养基,再加1000u/ml IFN‑γ,在体积浓度为5%的CO<sub>2</sub>,37℃下的恒温培养箱培养24小时;再加 100ng/ml 单克隆抗体 CD3及500u/ml IL‑2 ,继续培养3‑5天;每隔 2 天补加 500u/ml IL‑2,同时加50ng/ml 的 IL‑15,或加 100ng/ml 的 IL‑21,或加25ng/ml 的IL‑15 及50ng/ml 的 IL‑21;扩增至第 10 天收获 CIK 细胞。
地址 550005 贵州省贵阳市高新区都匀路109号