一种基于化学衍生的磷脂分类检测和定量方法

摘要

本发明公开一种基于化学衍生的磷脂分类检测和定量方法，属于磷脂定量检测方法技术领域。其应用三甲基硅重氮甲烷对待测样本中磷脂分子中的磷酸基团进行甲酯化衍生；电离样本中经过甲酯化衍生的磷脂分子，产生若干种待质谱检测的离子；在相应的待质谱检测的离子的选择上，根据不同磷脂种类选择加合H⁺或者NH₄⁺的离子；根据不同种类离子的质谱裂解规律设定不同的中性丢失或者前体离子扫描模式，得到不同种类离子的质谱离子型号的量；最后，通过与内标比较及运算，得到样本中不同种类磷脂分子的量。该方法检测速度快，灵敏度高。

主权项

一种基于化学衍生的磷脂分类检测和定量方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：从待检测样本中提取待检测磷脂；步骤2：应用三甲基硅重氮甲烷对样本中的磷脂分子中的磷酸基团进行甲酯化衍生，降低磷脂分子的电负性；步骤3：电离样本中经过甲酯化衍生的磷脂分子，产生若干种待质谱检测的离子，所述待检测的离子种类包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、溶血性磷脂酰胆碱、溶血性磷脂酰乙醇胺、溶血性磷脂酰丝氨酸、溶血性磷脂酸、溶血性磷脂酰甘油、溶血性磷脂酰肌醇；步骤4：在所述磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、溶血性磷脂酰胆碱、溶血性磷脂酰乙醇胺、溶血性磷脂酰丝氨酸、溶血性磷脂酸、溶血性磷脂酰甘油、溶血性磷脂酰肌醇上，分别选取加合H⁺的离子；在磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇上，分别选取加合NH₄⁺的离子；根据所述步骤3中不同种类离子的质谱裂解规律，设定不同的中性丢失或前体离子扫描模式，利用质谱对所述步骤3中不同种类离子进行分类检测，得到所述步骤3中不同种类离子的质谱离子信号的量；步骤5：通过与内标比较，将所述步骤4得到的所述步骤3中不同种类离子的质谱离子信号的量关联于样本中磷脂分子的量，得到样本中不同种类磷脂分子的量。