发明名称 一种环氧化物水解酶突变体及其制备方法
摘要 本发明公开一种环氧化物水解酶突变体及其制备方法,环氧化物水解酶突变体是将如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第8位、第26位、第83位、第90位和第122位的氨基酸进行单点突变或多点突变获得。制备方法:将编码环氧化物水解酶的基因克隆到质粒pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a(+)-EH;采用滚环PCR扩增质粒pET28a(+)-EH,得到含有编码环氧化物水解酶突变体的基因序列的开环重组载体;将含有编码正确突变体的基因的PCR反应液转化感受态大肠杆菌DH5α,挑取正确复制子,并提取正确突变质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达。与野生型环氧化物水解酶相比,本发明环氧化物水解酶具有极高的温度稳定性和pH值适应范围,可以大大提高工业化生产中环氧化物水解酶的使用寿命。
申请公布号 CN105018443A 申请公布日期 2015.11.04
申请号 CN201510460244.2 申请日期 2015.07.30
申请人 浙江大学 发明人 林建平;乔沛;朱力;吴绵斌;杨立荣
分类号 C12N9/14(2006.01)I;C12N15/55(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 主分类号 C12N9/14(2006.01)I
代理机构 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人 黄平英
主权项 一种环氧化物水解酶突变体,其特征在于,所述环氧化物水解酶突变体是将如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第8位、第26位、第83位、第90位和第122位的氨基酸进行单点突变或多点突变获得。
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