发明名称 |
单个基因mRNA甲基化水平检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种单个基因mRNA甲基化水平检测方法,包括以下步骤:1)、设计靶基因甲基化区域的荧光定量引物;2)、提取总RNA,用化学断裂法将总RNA片段化为RNA片段;3)、将步骤2)得到的片段化的RNA通过特异性识别m<sup>6</sup>A的抗体将带有m<sup>6</sup>A位点的所有mRNA片段沉淀下来,并用琼脂糖磁珠进行收集富集;4)、将步骤3)中抗体富集得到的mRNA片段反转录,用步骤1)的荧光定量PCR引物进行实时荧光定量PCR,即可得到含甲基化的靶基因相对表达量,相对表达量的高低就代表了单个基因mRNA甲基化水平高低。 |
申请公布号 |
CN105018617A |
申请公布日期 |
2015.11.04 |
申请号 |
CN201510429231.9 |
申请日期 |
2015.07.20 |
申请人 |
浙江大学 |
发明人 |
汪以真;王新霞;江芹;蔡旻 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
杭州中成专利事务所有限公司 33212 |
代理人 |
金祺 |
主权项 |
单个基因mRNA甲基化水平检测方法中所用的引物,其特征是:靶基因为C/EBPα基因,引物为:C/EBPα‑P2F gacacggtgcgtctaagatgagC/EBPα‑P2R tcggagcggtgagtttgc。 |
地址 |
310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 |