流感病毒RNA聚合酶结晶的方法

摘要

本发明公开了一种流感病毒RNA聚合酶结晶的方法。本发明提供的流感病毒RNA聚合酶结晶的方法，为先将流感病毒RNA聚合酶的PB1亚基编码基因、PA亚基编码基因和PB2亚基截短体的编码基因在昆虫细胞表达，得到RNA聚合酶，再进行纯化、结晶，得到流感病毒RNA聚合酶晶体。本发明的实验证明，本发明利用了不同长度的截短保留氨基端的PB2蛋白片段与其它两个亚基全长蛋白进行共表达纯化及复合体组装，这一截短后的小复合体可以在多种截短情况下、使用不同毒株获得晶体。本方法不仅为流感病毒聚合酶的结构解析奠定基础，同时，对抗流感病毒药物筛选、广谱性疫苗和药物的设计研发进程也将具有重要意义。

主权项

一种流感病毒RNA聚合酶复合体表达、纯化及结晶的方法，为先将流感病毒RNA聚合酶的PB1亚基编码基因、PA亚基编码基因和PB2亚基截短体的编码基因在离体的昆虫细胞中共表达、纯化，得到RNA聚合酶，再将所述RNA聚合酶与RNA结合形成复合体，再将所述复合体结晶，得到流感病毒RNA聚合酶晶体；所述PB2亚基截短体由PB2亚基自N末端起第1至N位氨基酸残基组成；N＝37‑280中的任一自然数。