烯酰辅酶A水合酶在己二酸生物合成中的应用

摘要

一种烯酰辅酶A水合酶在己二酸生物合成中的应用，本发明所采用的烯酰辅酶A水合酶不仅具有催化3‐羟基己二酰辅酶A向2,3‐烯‐己二酰辅酶A转化的活性，它在己二酸合成途径中还具有更好的催化能力。通过将其替换已有烯酰辅酶A水合酶(Crt)，大肠杆菌内己二酸的产量提高了数倍。本发明所鉴定的烯酰辅酶A水合酶从一定程度克服了现有己二酸生物合成途径效率不高的瓶颈，为己二酸以及类似化合物的生物合成提供了更大的潜力。

主权项

一种烯酰辅酶A水合酶在己二酸生物合成中的应用，其特征在于，将来源于Ralstoniaeutropha H16的烯酰辅酶A水合酶用于己二酸的发酵生产；所述的编码3‐羰基己二酰辅酶A硫解酶的基因为PaaJ，来源于大肠杆菌；所述的编码3‐羟基酰基辅酶A脱氢酶的基因为PaaH1，来源于真氧产碱杆菌H16RalstoniaeutrophaH16；所述的编码反‐2‐烯酰辅酶A还原酶的基因为Ter，来源于眼虫藻Euglena gracilis；所述的编码磷酸丁酰转移酶的基因为Ptb，来源于丙酮丁酸梭菌Clostridium acetobutylicumATCC 824；所述的编码丁酸激酶的基因为Buk1，来源于丙酮丁酸梭菌Clostridium acetobutylicumATCC824；所述的编码烯酰辅酶A水合酶基因为Ech，来源于真氧产碱杆菌RalstoniaeutrophaH16。