以顶芽为启动材料的牛角瓜种苗组培快速扩繁的方法

摘要

以顶芽为启动材料的牛角瓜种苗组培快速扩繁的方法，涉及植物无性繁殖的方法。本发明培养步骤包括：顶芽伸长；促腋芽快速增殖，即将增殖苗25天继代转接，重复此过程实现快速增殖；组培生根移栽等。本发明增殖系数和遗传性状稳定，且省去了壮苗培养阶段，以及生根后的自然光炼苗阶段，操作简单，生产成本低，能够满足牛角瓜优良单株的产业化生产需求。

主权项

以顶芽为启动材料的牛角瓜种苗组培快速扩繁的方法，按以下步骤进行：（1）采集顶芽:选取牛角瓜优良单株上生长健壮、尚未木质化的枝条，去除叶片，从顶芽下部3‑4cm处剪断，保留顶芽部分3‑4cm长，获得的顶芽进行下一步的消毒及培养；所选取的牛角瓜优良单株上生长健壮、尚未木质化的枝条为嫩枝；（2）顶芽伸长培养：将采集的顶芽进行消毒处理，去除叶柄、切除顶芽基部和顶端的褐化部分，控制顶芽长度在2‑3cm之间，切除顶端褐化部分时需保留芽尖，两端褐化部分切除后，接种于顶芽启动培养基上，在启动培养条件下培养1周，顶芽开始生长，20天后将伸长生长的顶芽进行下一步的增殖培养； 所述的启动培养基为MS+6‑BA0.1‑0.3mg/L+NAA0.1mg/L+0.1g/L活性碳+30g/L白砂糖，pH值5.8‑6.0；  所述的启动培养条件的光强为1500‑2000Lx，光照时间为12小时/天，温度为23±2℃；（3）促腋芽快速增殖培养：将伸长生长的顶芽去顶后切成带1‑2个节间的茎段，去除茎段上的叶柄，横放在增殖培养基上进行培养，25天后进行继代转接，此后，重复本步骤，快速增殖，芽苗增殖后进行生根培养；所述的增殖培养基为MS+6‑BA0.5‑1.0mg/L+KT0.2 mg/L +NAA0.1mg/L+30g/L白砂糖，pH值5.8‑6.0；所述的培养条件与步骤（2）相同；所述的增殖培养的繁殖倍数为5倍以上；（4）丛生芽生根培养：将小苗单株切下，保留2‑4个叶片，置于生根培养基进行培养，20天后生根培养生根率达100%，根系呈辐射状，单株平均根系10条以上；所述的生根培养基为1/2MS+IBA0.1‑0.3mg/L+0.1g/L活性碳+15g/L白砂糖，pH值5.8‑6.0，所述的培养条件与步骤（2）相同； （5）组培苗移栽和定植。