一种华重楼植株的快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种华重楼植株的快速繁殖方法，该方法包括愈伤组织的诱导、不定芽的分化、生根培养及炼苗和移栽步骤，所采用的不定芽的诱导和快速增殖培养基为MS＋6-BA 1.0～4.0mg·L^-1＋IAA0.1～1.0mg·L^-1＋KT 0.1～1.0mg·L^-1+头孢曲松钠200～500mg·L^-1，生根培养基为1/2MS＋IBA 0.1～1.0mg·L^-1+NAA0.1～0.5mg·L^-1+活性碳0.1～1.0%。本发明首次在华重楼愈伤组织诱导的基础上,进一步提出了其不定芽的诱导与快速增殖、无根苗生根及炼苗和移栽等方法，为华重楼优良品种的培育和组培苗的大量快速繁殖提供了一条新途径，可实现华重楼植物在短时间和低成本条件下大批量生产。

主权项

一种华重楼植株的快速繁殖方法,包括如下步骤：愈伤组织的诱导：取华重楼植物的根茎，先用流水洗净后吸干表面的水分，然后切除根茎上的不定根，再在超净工作台上切取带芽体的1～3个茎节，先用0.1％～0.2％升汞消毒6～12min，再用无菌水冲洗3～6次后切除其上的芽体，接着将上述根茎茎节切成0.5～1.5cm³大小后接入MS+6‑BA 0.5～2.0mg·L^‑1+NAA 0.5～2.0mg·L^‑1+2,4‑D 1.0～3.0mg·L^‑1的培养基中，先置于4～10℃的冰箱中低温处理8～18天，再在培养温度为12～25℃、每天光照4～12小时、光照强度为800～1200lx的条件下进行培养；不定芽的诱导和快速增殖：将华重楼愈伤组织切成1～3cm³大小后接入MS+6‑BA 1.0～4.0mg·L^‑1+IAA 0.1～1.0mg·L^‑1+KT 0.1～1.0mg·L^‑1+头孢曲松钠200～500mg·L^‑1的培养基中，在培养温度为4～8℃、每天光照8～12小时、光照强度为1000～1500lx的条件下进行培养；生根培养：当不定芽长至1.2～3.0cm时，将不定芽连同其基部的愈伤组织一同切下并转接到生根培养基1/2MS+IBA 0.1～1.0mg·L^‑1+NAA0.1～0.5mg·L^‑1+活性碳0.1～1.0％中，在培养温度为15～22℃、每天光照6～10小时、光照强度为500～1500lx的条件下进行培养；炼苗和移栽：当组培苗长出第一片心形真叶且不定根生长2～4条以上时，打开瓶盖，将组培苗从培养瓶中取出，洗去其上的培养基后，先将其放入无菌水中栽培3～7天，然后再移栽至松软的土壤中生长。