发明名称 |
一种赖氨酸脱羧酶、制备方法及其应用 |
摘要 |
本发明涉及一种赖氨酸脱羧酶、制备方法及其应用。本发明采用易错PCR和DNA改组这两种技术相结合的定向进化策略,对本实验室构建的一株含编码赖氨酸脱羧酶基因ldc的菌株进行了改造,获得一株比酶活提高了2.01倍的突变菌株,突变使得产物1,5-戊二胺的发酵生产时间缩短了25%。本发明还提出了一种筛选赖氨酸脱羧酶的快速平板筛选方法,把每一轮的筛选过程缩短了1-2天。在突变体的氨基酸中,涉及到的氨基酸突变为Val147Phe/Glu583Gly。本发明也公开了编码赖氨酸脱羧酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。本发明具有高效性和简便的可操作性。 |
申请公布号 |
CN103789292B |
申请公布日期 |
2015.10.21 |
申请号 |
CN201310727834.8 |
申请日期 |
2013.12.26 |
申请人 |
南京工业大学 |
发明人 |
蔡恒;张凯 |
分类号 |
C12N9/88(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P13/00(2006.01)I;C12Q1/527(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/88(2006.01)I |
代理机构 |
北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 |
代理人 |
王伟锋 |
主权项 |
一种赖氨酸脱羧酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。 |
地址 |
211816 江苏省南京市浦口区浦珠南路30号 |