一种神经元、星形胶质细胞共培养体的建立方法

摘要

本发明公开了一种神经元、星形胶质细胞共培养体的建立方法，包括以下步骤：培养试验动物；提取分离神经元和星形胶质细胞并分别重悬沉淀；分别接种培养；进行免疫荧光鉴定；鉴定后的神经元细胞和星形胶质细胞共培养，建立共培养体。本发明的方法以原代培养的神经元和星形胶质细胞为材料，以Transwell小池为骨架建立了两种细胞的共培养体系，两种细胞之间既存在一定的相互联系，又可以相互分离，可以对神经元、星形胶质细胞在共培养体系的基础上进行相对独立的研究，尤其适用于基于两种细胞相互调控基础上的生理、病理及药理研究，解决了在体神经元、星形胶质细胞无法实现有效分离的问题，在神经系统相关研究中具有较高的实用价值。

主权项

一种神经元、星形胶质细胞共培养体的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：从试验动物中提取分离神经元和星形胶质细胞并分别重悬沉淀；将重悬沉淀后的神经元细胞和星形胶质细胞分别接种培养；培养后的神经元细胞和星形胶质细胞分别进行免疫荧光鉴定；将鉴定后的神经元细胞和星形胶质细胞共培养，建立神经元细胞和星形胶质细胞共培养体；所述共培养体的建立方法为，将神经元细胞接种于6孔板底部生长10d；将所述星形胶质细胞接种于Transwell小池外侧底部，6h后用D‑Hank’s清洗Transwell小池外侧，洗去未贴壁细胞，再将Transwell小池插入已接种神经元细胞并生长10d的所述6孔板内，在孔内加入完全培养基，共培养3d。