一种提高小球藻光合作用效率的化学复合诱变方法

摘要

本发明公开了一种提高小球藻光合作用效率的化学复合诱变方法，将从自然水源中分离出的出发小球藻株，采用无菌光照培养箱，在25℃±1℃，光照强度3000Lux条件下，于液体培养基A中活化培养12-14h；选取生长相对较好，呈墨绿色的藻株作为诱变藻株，挑选后于液体培养基A₂中纯培养，作诱变原藻液，然后采用长春花碱与秋水仙碱（1:4）协同诱导，使自然界淡水普生性单细胞类小球藻（Chlorella Vulgaris Beijerinck）核和叶绿体DNA均加倍，提高光合作用效率，使受有机物源污染的水质净化，又可显著改善高含N、P、K水质的状态；通过化学复合诱变获得一种既能应用改善淡水水源品质，又可培育为鱼饲料的藻株。

主权项

一种对N、P、K所污染水净化的小球藻进行化学复合诱变方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将从自然水源中分离出的出发小球藻株，采用无菌光照培养箱，在25℃±1℃，光照强度3000Lux条件下，于液体培养基A₂中活化培养12‑14h；选取生长相对较好，呈墨绿色的藻株作为诱变藻株，挑选后于液体培养基A₂中纯培养，并作诱变原藻液；所述的液体培养基A₂为每升水中含(NH₄)₂SO₄ 或NH₄Cl或(NH₄ )₂CO₃ 500mg，MgSO₄·7H₂O或MgCl₂ 20mg，CaCl₂或CaCO₃ 10mg，K₂HPO₄ 1.44g，KH₂PO₃720mg，FeSO₄·7H₂O 5mg， CoCl₂·6H₂O 2mg，(NH₄)₆MoO₂·4H₂O 2mg，H₃PO₃ 1000mg；pH为6.5‑7.2；（2）按长春花碱：秋水仙碱=1:4质量比混合作为诱导剂，加入到步骤（1）的原藻液中，诱导剂的加入量为终浓度0.03‑0.05wt%，加入后将原藻液于3000Lux、27℃± 1℃下培养48h或96h；诱导结束后，将原藻液离心去上清液后取沉淀，并立即加入无菌液体培养基A₂进行自我修复，先避光5h，然后于25℃±1℃、3000Lux下无菌培养4d至稳定期，经固体培养基纯化培养后得到遗传稳定性好的小球藻；所述固体培养基由液体培养基A₂+1.0wt%琼脂得到。