| 主权项 |
一种绿色微囊藻细胞抑制率的测定方法，其特征在于具体包括如下步骤：（1）、绿色微囊藻细胞密度与吸光度之间的关系曲线的建立取10份1ml对数期的绿色微囊藻细胞，分别用培养基对其进行稀释2、3、5、8、10、20、50、80、100、500倍得到不同浓度的绿色微囊藻细胞液，以培养基作为空白对照，将稀释后的不同浓度的绿色微囊藻细胞液和空白对照加入微孔板中，每组6～8个平行样；所述的培养基为灭菌的BG‑11；通过酶标仪测定每个浓度绿色微囊藻细胞液样品在波长750nm处的吸光度，取平均值得到该浓度绿色微囊藻细胞液的吸光度A<sub>i</sub>，同时用显微镜对每一个浓度的绿色微囊藻细胞液中绿色微囊藻细胞进行精确计数，每个样品重复6～8次，取平均值得到绿色微囊藻细胞密度C<sub>i</sub>，即单位体积藻液中绿色微囊藻的细胞数；以绿色微囊藻细胞密度为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，线性回归得到绿色微囊藻细胞密度与吸光度之间的关系曲线；（2）、受试物作用后的绿色微囊藻细胞密度的测定将已加入受试物的绿色微囊藻样品和未加受试物的绿色微囊藻样品进行稀释，使稀释后的待测绿色微囊藻液中绿色微囊藻细胞密度在步骤（1）的关系曲线的线性范围内，在与步骤（1）相同条件下，采用酶标仪测定稀释后的加入受试物的绿色微囊藻样品和稀释后未加受试物的绿色微囊藻样品在波长750nm处的吸光度，然后代入到步骤（1）的关系曲线中，求得加入受试物和未加受试物作用不同时间后的绿色微囊藻液中绿色微囊藻细胞密度；所述的受试物为除草剂草甘膦、精喹禾灵，禾草灵或乙草胺；（3）、受试物作用后的绿色微囊藻细胞密度随时间变化的生长趋势曲线和不加入受试物的绿色微囊藻细胞密度随时间变化的生长趋势曲线的绘制根据步骤（2）中加入受试物作用不同时间后的绿色微囊藻细胞的细胞密度，绘制加入受试物作用条件下的绿色微囊藻细胞密度随时间变化的生长趋势曲线；根据步骤（2）中未加受试物作用的不同时间后的绿色微囊藻细胞的细胞密度，绘制未加受试物作用条件下的绿色微囊藻细胞密度随时间变化的生长趋势曲线；（4）、绿色微囊藻细胞抑制率计算根据步骤（3）中已绘制的受试物作用不同时间后的绿色微囊藻细胞的细胞密度随时间变化的生长趋势曲线和未加受试物作用条件下的绿色微囊藻细胞密度随时间变化的生长趋势曲线，按下列公式计算绿色微囊藻细胞抑制率：绿色微囊藻细胞抑制率%=100‑（N<sub>t</sub>‑N<sub>0</sub>）/(N<sub>ct</sub>‑N<sub>c0</sub>)×100；式中：N<sub>t</sub>为受试物作用第t时刻后的绿色微囊藻细胞的细胞密度；N<sub>0</sub>为受试物作用初始的绿色微囊藻细胞的细胞密度；N<sub>ct</sub>为未加受试物作用的第t时刻后的绿色微囊藻细胞的细胞密度；N<sub>c0</sub>为未加受试物作用的初始的绿色微囊藻细胞的细胞密度。 |
