一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法

摘要

本发明公开了一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，它包括：1）提取结核分枝杆菌总RNA，反转录成cDNA；2）以cDNA为模板，用内参基因16SrRNA引物，检测基因Rv3519引物荧光定量PCR检测；最后由公式：Rv3519基因的相对表达量=2^-ΔΔCt，计算结核分枝杆菌中Rv3519基因的相对含量。确定结核分枝杆菌中的Rv3519表达差异，通过对不同的结核分枝杆菌检测，结果表明Rv3519表达量越高，成膜能力越强，与对结核分枝杆菌培养后，再进行结晶紫染色法检测被膜的结果相符。时间短、操作简便、特异性好、灵敏度高、检测成本低，不需要对结核分枝杆菌进行培养，安全可靠。为研究结核分枝杆菌的耐药性提供可靠的实验基础。

主权项

一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，它包括：1）提取结核分枝杆菌总RNA，反转录成cDNA；2）以cDNA为模板，用内参基因16SrRNA的上游引物5’‑AAGAAGCACCGGCCAACTAC‑3’，下游引物5’‑ TCGCTCCTCAGCGTCAGTTA ‑3’；检测基因Rv3519的上游引物5’‑ GTTCATCCATCATCTGCC ‑3’，下游引物5’‑ AAGTCCGCCATGATCTTC ‑3’；荧光定量PCR检测。